免疫學(xué)檢測(cè)法匯總(已修改)
2024-07-11 16:56 本頁面
【正文】 免疫學(xué)檢測(cè)法 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的用途非常廣泛，它們可用于有關(guān)免疫疾病的診斷、療效評(píng)價(jià)及發(fā)病機(jī)制的研究。如對(duì)傳染病、免疫增殖性疾病、免疫缺損病、超敏反應(yīng)、自身免疫病、移植排斥反應(yīng)腫瘤的免疫學(xué)檢測(cè)，對(duì)診斷、治療均有很大幫助。此外在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中對(duì)抗原性物質(zhì)或細(xì)胞的定性、定量檢查不僅推動(dòng)了對(duì)各種免疫學(xué)現(xiàn)象的研究，而且擴(kuò)大免疫學(xué)與醫(yī)學(xué)生物許多領(lǐng)域的聯(lián)系。本章僅介紹常用免疫學(xué)檢測(cè)方法的原理，簡(jiǎn)要過程和實(shí)用意義。第一節(jié) 抗原或抗體的檢測(cè) 一、檢測(cè)的原理 借助抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，對(duì)樣品中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定量、定位的檢測(cè)?！ ?．抗原與抗體的親和力(affinity)抗原抗體的結(jié)合就像酶與底物的結(jié)合，激素與其受體的結(jié)合一樣不是化學(xué)的反應(yīng)，而是非共價(jià)鍵的可逆的結(jié)合?？乖瓫Q定簇和抗體分子可變區(qū)互補(bǔ)構(gòu)型，造成兩分子間有較強(qiáng)的親和力?？臻g構(gòu)型互補(bǔ)程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強(qiáng)弱也不同?；パa(bǔ)程度高，則親和力強(qiáng)。此外，反應(yīng)溫度、酸堿度和離子濃度對(duì)抗原和抗體分子上各基因的解離性和電荷特性也有重要的影響，抗體與抗原決定簇之間的結(jié)合力大小可用親合力來表示。高親合力的抗體與抗原的結(jié)合力強(qiáng)，即使抗原濃度很低時(shí)也有較多的抗體結(jié)合抗原形成免疫復(fù)合物?！ ?．抗原或抗體外檢測(cè)原理根據(jù)抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的性狀與活性特點(diǎn)，對(duì)標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。定性和定位檢測(cè)比較簡(jiǎn)單，即用已知的抗體和待檢樣品混合，經(jīng)過一段時(shí)間，若有免疫復(fù)合物形成的現(xiàn)象發(fā)生，就說明待檢樣品中有相應(yīng)的抗原存在。若無預(yù)期的現(xiàn)象發(fā)生，則說明樣品中無相應(yīng)的抗原存在。同理也可用已知的抗原檢測(cè)樣品中是否有相應(yīng)抗體。 對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí)，以反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系?！ 。?）根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來推算樣品中抗原（或抗體）的含量：在一定的反應(yīng)條件下，加入的已知抗體（或抗原）的濃度一定，反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原（或抗體）量成正比。也就是抗體濃度一定時(shí)，免疫復(fù)合物越多則樣品中的抗原量也越多?？捎脤?shí)驗(yàn)性標(biāo)準(zhǔn)曲線推算出樣品中抗原（或抗體）的含量。如免疫單向擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫比濁試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫檢測(cè)等都屬于類方法。 ?。?）抗原或抗體效價(jià)滴定的原理：當(dāng)抗原抗體復(fù)合物形成多少不能反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)強(qiáng)弱時(shí)，就不能以檢測(cè)反應(yīng)強(qiáng)度來對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量。在實(shí)際工作中，把濃度低的反應(yīng)成分（抗原或抗體）的濃度固定，把濃度高的另反應(yīng)成分作一系列稀釋。例如用人血清作抗原免疫3只家兔，比較3只家兔產(chǎn)生抗體的多少，即滴定3只兔血清抗體效價(jià)，可用雙向瓊脂擴(kuò)散法來滴定，例如將抗體濃度固定，將抗原作不同的稀釋度，分別將抗原或抗體滴入瓊脂的相應(yīng)小孔中，觀察免疫兔血清與不同稀釋度的抗原出現(xiàn)明顯沉淀淺的抗原稀釋度（如甲兔的抗體效價(jià)為1/2000，而丙免的是1/8000則可比較出后者比前者產(chǎn)生抗體的效價(jià)要高）。也就是表示效價(jià)的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多。因人血清（抗原）和抗體（免疫兔血清）相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原?！ 《?、抗原或抗體檢測(cè)的實(shí)用意義 1．抗體檢測(cè)的意義檢測(cè)抗體可用于評(píng)價(jià)人和動(dòng)物免疫功能的指標(biāo)。抗體用于臨床治療或?qū)嶒?yàn)研究時(shí)也需做純度分析和定量測(cè)定。臨床上檢測(cè)病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對(duì)有關(guān)疾病的診斷有重要意義?！ ?．抗原檢測(cè)的意義可做為抗原進(jìn)行檢測(cè)的物質(zhì)可以下四類： （1）各種微生物及其大分子產(chǎn)物：用于傳染病診斷、微生物的分類及鑒定以及對(duì)菌苗、疫苗的研究。 ?。?）生物體內(nèi)各種大分子物質(zhì)：包括各種血清蛋白（如各類免疫球蛋白、補(bǔ)體的各種成分）、可溶性血型物質(zhì)、多肽類激素、細(xì)胞因子及癌胚抗原等均可做為抗原進(jìn)行檢測(cè)。在對(duì)這些成分的生物學(xué)作用的研究以及各種疾病的診斷有重要意義?！ 。?）人和動(dòng)物細(xì)胞的表面分子：包括
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