【正文】 使我在查閱資料、克服困難、編排創(chuàng)興上都有了很大的提高。經(jīng)歷了這次畢業(yè)設(shè)計(jì)，不僅對(duì)我的學(xué)習(xí)提供了幫助，而且在各方面也得到了鍛煉。細(xì)菌計(jì)數(shù)大腸埃希菌采用常規(guī)法回收率能達(dá)到要求的，控制菌都可以采用常規(guī)法檢查。 預(yù)試驗(yàn)時(shí)，可先驗(yàn)證金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的回收率。 Manik 等人 [17]研究了 49 種五環(huán)三萜類化合物的抗真菌活性，研究表明 C． 27或 28位有游離羧酸的齊敦果酸和長(zhǎng)春藤皂苷元的皂苷具有較強(qiáng)的抗真菌活性。因?yàn)橥ㄟ^(guò)藥品的處方和工藝流程可以幫助我們了解制劑中是否含有抑菌作用的藥材或添加物，然后通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒ㄈコ驕p少其抑菌影響，提高檢查的準(zhǔn)確度。儲(chǔ)備液的制備，應(yīng)注意質(zhì)量較輕的菌絲的影響。由菌絲和孢子組成，許多菌絲交織在一起成為菌絲體。但其含量相對(duì)于整個(gè)制劑 (包括輔料 )來(lái)說(shuō)是比較低的。果見表 22 表 22 大腸埃希菌驗(yàn)證結(jié)果 品種 批號(hào) 膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組 膽鹽 乳糖發(fā) 酵培養(yǎng) 基陽(yáng)性 對(duì)照組 膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基陰性對(duì)照組 MUG試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)組 MUG試驗(yàn) 陽(yáng)性對(duì)照 MUG試 驗(yàn) 陰性對(duì)照 UV 檢測(cè) 靛基質(zhì)試驗(yàn) UV 檢測(cè) 靛基質(zhì)試驗(yàn) UV檢測(cè) 靛基質(zhì)試驗(yàn) 感冒清膠囊 121230 + + — + + + + — — 131202 + + — + + + + — — 141127 + + — + + + + — — (表中‘‘ +，’表示在培養(yǎng)基中呈附性反應(yīng)或在試劑中呈正反應(yīng)；“ ’’表示不呈陽(yáng)性反應(yīng)或在試劑中不呈正反應(yīng)；‘‘士’’表示在未能通過(guò)觀察判斷結(jié)果 ) 表 2— 2 表明，各控制菌陽(yáng)性對(duì)照均能生長(zhǎng)，陰性對(duì)照 無(wú)菌生長(zhǎng) ， 試驗(yàn)組均能生長(zhǎng)，可用常規(guī)法檢查大腸 埃希菌。另外，感冒清膠囊因其含原藥材投料，所以還需進(jìn)行大腸菌群的檢查。在相應(yīng)的溫度下培養(yǎng) (細(xì)菌在 30～ 35℃培養(yǎng)48 小時(shí)，霉菌在 23～ 28℃培養(yǎng) 72小時(shí) )，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，取均值。． 9％氯化鈉 (分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào) :20200302）溶液， 菌種 金黃色葡萄球菌 [CmCC(B)26003]、大腸埃希菌 [CMCC(B)44102]、枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]、乙型副傷寒沙門菌 [CMCC(B)50094]、白色念珠菌 [CMCC(F)10123]；均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；黑曲霉 (ATCCl6404)購(gòu)自于廣東省微生物研究所。該法操作簡(jiǎn)單，是藥品檢驗(yàn)的常用方法之一。 陜西科技大學(xué)畢業(yè)論文 8 8 白色念珠菌 (Candida albicans， [CMCC(F)98 00 1] 白色念珠菌通常存在于正常人的口腔、上呼吸道、腸道及陰道，一般在正常機(jī)體中數(shù)量較少，不容易引起疾病?？莶菅挎邨U菌通常作為芽孢菌的代表 . 黑曲霉 (Aspergillus niger， [CMCC(F)98 003] 黑曲霉屬半知菌亞門真菌。 金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26 003] 前面控制菌檢查中亦已經(jīng)提及，所以也不再贅述。 在菌落計(jì)數(shù)方法學(xué)驗(yàn)證中，選取大腸埃希菌 (Escherichiacoli)[CMCC(B)441 02]、金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26 003]、枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis)[CMCC(B)63 501]、白色念珠菌 (Candida albicans， [CMCC(F)98001]、黑曲霉 (Aspergillus niger， [CMCC(F)98 003]五種菌作 為驗(yàn)證菌株。而為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性，微牛物限度檢查法需要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。 針對(duì)本論文藥品采用常規(guī)法，現(xiàn)對(duì)常規(guī)法介紹如下： 常規(guī)法是微生物限度檢查中最重要也是最基本的方法。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。它是用一定培養(yǎng)基在規(guī)定條件下培養(yǎng)后在固體平 板上呈現(xiàn)可見菌落，按規(guī)定方法計(jì)數(shù)報(bào)告的方法。如水溶性供試品可直接加入稀釋劑；不溶于水的固體制劑采用勻漿或加陜西科技大學(xué)畢業(yè)論文 6 6 混懸劑制成均勻的混懸液；非水溶性油劑或軟膏劑加入乳化劑 使之成為均勻分散的乳濁液；有抑菌成分的供試品加入消除抑菌成分的中和劑，以及采用離心沉淀和薄膜過(guò)濾等消除抑菌成分的方法等。這是由于藥品本身可能含有抑菌作用的組成及防腐劑等組分，一般認(rèn)為，這些組分在一定濃度下對(duì)微生物具有抑制或殺滅的作用，被抑制的微生物將因受到不同程度的損傷而可能影響檢查的準(zhǔn)確性[14]。由于藥品細(xì)菌數(shù)測(cè)定是活菌計(jì)數(shù)，所以最常用的是平皿法。所以，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意嚴(yán)格控制環(huán)境中的含氧量。人和家畜及昆蟲的腸道內(nèi)亦存在該類微生物，可隨糞便排泄，污染土壤和水源。 [12]目前，因?yàn)槠湮廴舅幤芬鹚幵葱约膊『歪t(yī)療事故的例子時(shí)有發(fā)生，所以加強(qiáng)對(duì)該菌的控制是必要的。葡萄球菌屬是無(wú)芽孢細(xì)菌中抵抗力最強(qiáng)的細(xì)菌，耐干燥，對(duì)多種消毒劑不敏感。廣泛分布于自然界，也存在于人和動(dòng)物皮膚及與外相通的腔道中。 沙門氏菌 沙門菌屬是腸桿菌科的重要致病菌。它不僅包括埃希菌屬中的某些細(xì)菌，還包括腸桿菌屬、枸櫞酸菌屬及克雷伯菌屬中的某些細(xì)菌 [11]。大腸埃希菌隨糞便排出體外，在土壤和水中如未被裂解可存活數(shù)天，在沃土表層則可存活更長(zhǎng)時(shí)間，有可能污染水、食品、藥品等。我國(guó)藥典采用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行各種制劑的霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)測(cè)定，當(dāng)制劑中含有蜂蜜和王漿時(shí)，需采用酵母浸出粉胨葡萄糖 (YPD)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行酵母菌計(jì)數(shù)測(cè)定。細(xì)菌計(jì)數(shù)以菌落數(shù)為單位，即cfu(colony forming units)。 細(xì)菌數(shù)測(cè)定 藥品細(xì)菌數(shù)測(cè)定是微生物的定量檢查，是用來(lái)判斷藥品被細(xì)菌污染程度和衛(wèi)生質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)，也是檢測(cè)中藥藥品質(zhì)量的指標(biāo)之一。未列入標(biāo)準(zhǔn)的劑型，則根據(jù)用藥途徑，參照同類劑型的微生物限度作了補(bǔ)充，如滴耳劑、滴鼻劑等。 1986 年衛(wèi)生部頒發(fā)了經(jīng)修改的《藥品衛(wèi)牛標(biāo)準(zhǔn)》， 1989 年又下達(dá)了《藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)充規(guī)定和說(shuō)明》。 1978 年國(guó)家衛(wèi)生部、化工部、商業(yè)部聯(lián)合頒發(fā)了我國(guó)第一個(gè)《藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》 [1][3]，該標(biāo)準(zhǔn)主要為中藥和化學(xué)藥，并按丸劑、片劑、散劑、沖劑及糖漿、合劑、水劑等劑型規(guī)定了微生物限度，包括細(xì)菌總數(shù)、霉菌總數(shù)的不同規(guī)定。微生物檢驗(yàn)分為強(qiáng)制性的無(wú)菌檢查 (要求不能檢出 )和非強(qiáng)