微生物限度檢查基本技術(shù)-wenkub.com
2024-12-26 22:59 本頁面
【正文】 因為膽鹽乳糖增菌液中的膽鹽，只能抑制某些革蘭氏陽性菌，所以某些假單胞菌和產(chǎn)氣菌等革蘭氏陰性菌都能生長，但不一定是大腸埃希菌，必要時可以進行分離培養(yǎng)。個人認(rèn)為應(yīng)先考察之前檢出的菌的量的數(shù)據(jù)，取 1ml或 10ml用于薄膜過濾。如先考察金葡和白念的回收率?？梢韵扔秒x心法， 500轉(zhuǎn) /3分鐘，然后進行薄膜過濾。一部藥典附錄規(guī)定：含動物臟器（包括提取物）及動物類原藥材粉（蜂蜜、王漿、動物角、阿膠除外）的口服溶藥制劑。 連續(xù)生產(chǎn)的不同批號同個品種的成品大腸埃希菌檢查，每批次都要做陽性對照嗎？ 答：同一天試驗的話，只要做一個陽性對照就可以；不是同一次試驗的話，每次都要做陽性對照。 計數(shù)方法驗證時，采用上述方法若還存在一株或多株試驗菌的回收率達(dá)不到要求，那么選擇回收情況最接近要求的方法和試驗條件進行供試品的檢驗。 個別產(chǎn)品微生物方法學(xué)驗證做不出怎么辦？ 答： 若沒有適宜的方法消除供試品中的抑菌作用，那么驗證試驗中微生物回收的失敗可看成是因供試品的抗菌活性引起的，同時表明該供試品不能被試驗菌污染。沒有用到稀釋劑不用做稀釋劑對照組。細(xì)菌數(shù)不得超過 1000個 /100㎝２ , 霉菌、酵母菌數(shù)不得過 100個 /100㎝２ ,大腸桿菌不得檢出。 藥用復(fù)合硬片、藥用復(fù)合膜和袋、藥用鋁箔、藥用復(fù)合墊片 取本品用開孔面積 20㎝２的消毒過的金屬模版壓在內(nèi)層面上，將無菌棉簽用 %無菌氯化鈉溶液，稍沾濕，在板孔內(nèi)擦抹 5次，換 1支棉簽再擦抹 5次，每個位置用兩支棉簽共擦抹 10次，共擦抹 5個位置 100㎝２。細(xì)菌數(shù)每瓶不得超過 100個，霉菌、酵母菌數(shù)每瓶不得超過 100個，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每瓶不得檢出。細(xì)菌數(shù)每瓶不得超過 100個，霉菌、酵母菌數(shù)每瓶不得超過 100個，大腸桿菌每瓶不得檢出。細(xì)菌數(shù)每瓶不得超過 1000個，霉菌、酵母菌數(shù)每瓶不得超過 100個，大腸桿菌每瓶不得檢出。 金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌 每 1g、 1m1或 10cm178。 （ 7． 2）、陰道、尿道給藥制劑 細(xì)菌數(shù) 每 1g、 1m1或 10cm178。每 1m1不得過 100個。 若供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)、控制菌三項檢驗結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定，若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。 表 3 可能的大腸菌群數(shù)表 各供試品量的檢出結(jié)果 可能的大腸菌群數(shù) N(個 /g或 ml) ml + + + _ + + _ _ + _ _ _ ＞ 1000 100＜ N＜ 1000 10＜ N＜ 100 ＜ 10 注 +代表檢出大腸菌群；一代表未檢出大腸菌群。 若平板上無菌生長，或生長的菌落與表 2所列的菌落形態(tài)特征不符或為非革蘭陰性無牙孢桿菌，判該管未檢出大腸菌群；若平板上生長的菌落與表 2所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，且為革蘭陰性無牙孢桿菌應(yīng)進行確證試驗。若平板上無菌落生長、或生長的菌落與麥 1所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，應(yīng)進行分離、純化、染色鏡檢查和適宜的生化試驗，確認(rèn)是否為大腸埃希菌。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質(zhì)陽性；呈試劑本色，為靛基質(zhì)陰性。 （ 4）控制菌檢查方法的驗證 （ 4． 1）菌種 對試驗菌種的要求同細(xì)菌、霉菌及酵母計數(shù)方法的驗證。 （ 3． 2． 1）、陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液 1m1照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。若供試品每 1g或 1m1所含的菌較多時，取適宜稀釋級的供試液 1m1，過濾。為發(fā)揮濾膜的最大過濾效率，應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗覆蓋整個濾膜表面。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。另外，供試液的平皿底部接觸時間太長，會使菌液藥渣附著不宜搖散。 可以在培養(yǎng)基中加 ? 的 TTC 。 菌落數(shù)報告舉例 序列 各稀釋級平板平均菌落數(shù) 菌落數(shù) 1： 10 1： 100 1： 1000 1 35 2 0 350 2 96 37 2 960 3 不可計 200 35 28000 4 25 4 2 250 5 0 0 0 ＜ 10 （ 3． 1． 4）、操作的注意事項 制備的供試液力求分散均勻，使之菌體能均勻分散，其次在每次吸取供試液注皿的時候，都要把供試液搖勻，這樣能使兩個平板上生長的菌落數(shù)比較接近。 當(dāng)同時有 2個稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定時，視兩者比值（比值為高稀釋級的菌數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值除以低稀釋級的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值）而定。然后將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的霉菌
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