雙波長(zhǎng)法快速測(cè)定蛋白質(zhì)含量-資料下載頁(yè)
2024-10-03 21:59本頁(yè)面
【正文】 ,而且游離考馬斯亮蘭染料在參考文獻(xiàn)595nm的吸收度也要發(fā)生變化 ,所用單采用 595nm波長(zhǎng)的吸收度不能確切反映染料 蛋白質(zhì)濃度的變化。在 450nm波長(zhǎng)時(shí) ,其吸收度 A在一定范圍內(nèi)隨蛋白質(zhì)濃度呈負(fù)相關(guān) ,主要是因?yàn)殡S著蛋白質(zhì)濃度的增加 ,游離染料逐漸減少 ,所以 A595/ A450隨蛋白質(zhì)濃度變化的靈敏性比 A595更明顯 (圖 4)。在傳統(tǒng)考馬斯亮蘭測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí) ,通常以可見(jiàn) 紫外分光光度計(jì)作為檢測(cè)儀[ 2 ]。其檢測(cè)池所需樣品體積至少 1ml ,因此所需的檢測(cè)樣品較多 ,浪費(fèi)較大。傳統(tǒng)分光光度法在檢測(cè)過(guò)程中 ,需不斷清洗樣品池和重復(fù)檢測(cè)過(guò)程 ,其重復(fù)性勞動(dòng)性多 ,易出現(xiàn)操作錯(cuò)誤 ,增加了實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差和可能出現(xiàn)1 Kirazov L P , Venkov L G , Kirazov EP. Comparison of t heLowry and t he Bradford protein assays as applied for proteinestimation of membrane containing fractions. AnalBiochem ,1993 ,208 (1)∶442 Gasparov VS ,Degtiar V G. Protein determination by bindingwit h t he dye Coomassie brilliant blue G 250. Biokhimiia ,1994 ,59 (6)∶763terference in t he Bradford protein assay. Anal Biochem ,1985 ,151 (2)∶3694 Denizot F ,Lang R. Rapid colorimetris assay for cell growt hand survial. J Immunol Met hods ,1986 ,89∶271(1999年 11月 15日收稿)3 Compton SJ ,Jones CG. Mechanism of dye response and in2內(nèi)容總結(jié)
（1）蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) 2000
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