雙波長法快速測定蛋白質(zhì)含量(更新版)
【正文】 白質(zhì)檢測的線性范圍 :為了適合酶標(biāo)儀濾光片的檢測 ,以 595nm和 450nm作為檢測波長 ,將 BSA從 1mg倍比稀釋至 240pg/ ml ,以檢測樣品在各濃度 C時的吸收度。2. 3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 :在檢測限范圍內(nèi) ,以蛋白質(zhì)濃度 C為橫坐標(biāo) ,吸收度 A為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。在測定過程中隨著蛋白質(zhì)濃度的增加 ,游離考馬斯亮蘭染料逐漸減少 ,因此在蛋白質(zhì)濃度發(fā)生改變時 ,不但染料 蛋白質(zhì)結(jié)合物在 595nm的品僅 100μl或更少 ,而且一次可檢測大量的標(biāo)本 ,過程自動化程度較高 ,適用于樣品體積較少和大量樣品的檢測。傳統(tǒng)分光光度法在檢測過程中 ,需不斷清洗樣品池和重復(fù)檢測過程 ,其重復(fù)性勞動性多 ,易出現(xiàn)操作錯誤 ,增加了實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差和可能出現(xiàn)1 Kirazov L P , Venkov L G , Kirazov EP. Comparison of t heLowry and t he Bradford protein assays as applied for proteinestimation of membrane containing fractions. AnalBiochem ,1993 ,208 (1)∶442 Gasparov VS ,Degtiar V G. Protein determination by bindingwit h t he dye Coomassie brilliant blue G 250. Biokhimiia ,1994 ,59 (6)∶763terference in t he Bradford protein assay. Anal Biochem ,1985 ,151 (2)∶3694 Denizot F ,Lang R. Rapid colorimetris assay for cell growt hand survial. J Immunol Met hods ,1986 ,89∶271(1999年 11月 15日收稿)3 Compton SJ ,Jones CG. Mechanism of dye response and in2內(nèi)容總結(jié)
（1）蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報 2000
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