研發(fā)部崗前培訓(xùn)細(xì)胞培養(yǎng)-資料下載頁
2025-01-20 13:33本頁面
【正文】 遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒，使空氣得到凈化 ? 凈化空氣徐 徐通過工作臺(tái)面，使工作臺(tái)內(nèi)構(gòu)成無菌環(huán)境。 CO2培養(yǎng)箱 ? CO2培養(yǎng)箱設(shè)定的條件為 37 ℃ ， 5％ CO2 ? 使用 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)注意的問題： ① 用螺旋口瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，需將瓶蓋微 松，以保證通氣 ② 保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈。定期消毒（ 90 ℃ ， 14 h) ③ 箱內(nèi)火菌蒸餾水 3000毫升蒸餾水槽中以 保持箱內(nèi)濕度，避兔培養(yǎng)液蒸發(fā) 純水儀 七、器械 用于解剖動(dòng)物、取材和原代培養(yǎng)切割組織等 解剖刀（剪）、鑷子、縫針（線）、持針器、止血鉗等 八、培養(yǎng)器皿 （一）玻璃瓶皿 玻璃瓶：用于配制、儲(chǔ)存培養(yǎng)液、血清等 培養(yǎng)瓶：用于培養(yǎng)細(xì)胞 培養(yǎng)皿：用于培養(yǎng)和分離細(xì)胞 吸管、離心管、燒瓶（杯）、量筒、漏斗、試管、注射器等 （二）塑料瓶皿 多孔培養(yǎng)板：適于做單細(xì)胞克隆、生長曲線測定、藥物測試和單克隆抗體等研究：分為 2 96孔板 培養(yǎng)皿： 培養(yǎng)瓶：適于在 CO2培養(yǎng)箱中使用 九、培養(yǎng)基（液） （一）平衡鹽溶液： （二）天然培養(yǎng)基：血清、組織提取液、雞 血漿等 （三）合成培養(yǎng)基 培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是維持體外細(xì)胞生存和生長的溶液，分天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基 天然培養(yǎng)基： 天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液（如雞胚和牛胚浸液） 優(yōu)點(diǎn)：營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果好 缺點(diǎn)：來源受限。成分復(fù)雜， 影響對某些實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的提取和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析 。易發(fā)生支原體污染 合成培養(yǎng)基 : 合成培養(yǎng)基是根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量，用人工方法模擬合成的。目前已設(shè)計(jì)出許多種培養(yǎng)基，如TC19 MEM、 RPMI16 DMEM等 合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì) 優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，組分和含量相對固定。成本低 缺點(diǎn)：缺少某些成分，不能完全滿足體外細(xì)胞生長需要 人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清） 血清中含有： ① 多種蛋白質(zhì) （ 白蛋白 、 球蛋白 、 鐵蛋白等 ） ② 多種金屬離子 ③ 激 素 ④ 促貼附物質(zhì) ， 如纖粘蛋白 、 冷析球蛋白 、 膠 原等 ⑤ 各種生長因子 ⑥ 轉(zhuǎn)移蛋白 ⑦ 不明成分 血清質(zhì)量好壞是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵： 常用血清有胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、兔血清、馬血清等，其中以胎牛血清質(zhì)量最好 優(yōu)質(zhì)血清的標(biāo)準(zhǔn)：透明，淡黃色，無沉淀物，無細(xì)菌、支原體、病毒污染 血清的滅活（消除補(bǔ)體活性）： 56 ℃ ， 30 分鐘 血清的消毒：過濾除菌 抗菌素的使用： 在培養(yǎng)液配制后，培養(yǎng)液內(nèi)常加適量抗菌素，以抑制可能存在的細(xì)菌的生長 通常是青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用。培養(yǎng)基內(nèi)青霉素、鏈霉素最終使用濃度為每毫升 100單位 慶大霉素：每毫升 100單位，方便、廣譜、穩(wěn)定 謝 謝！
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