研發(fā)部崗前培訓(xùn)細(xì)胞培養(yǎng)-文庫(kù)吧
2025-01-10 13:33 本頁(yè)面
【正文】 因生長(zhǎng)發(fā)育的需要，有些成分在小牛出生后會(huì)發(fā)生一些變化。不過(guò)還沒(méi)有搞清楚它與其它的血清之間的差別。有一點(diǎn)可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。 最為重要的一點(diǎn)是： 胎牛本身生活在一個(gè)潔凈環(huán)境當(dāng)中，其血清與外界隔絕，只要生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范，其質(zhì)量肯定要比后兩者好。 根據(jù)牛出生時(shí)間和血清采制分離方法分為： （ 1）胎牛血清：八月齡胎牛心臟穿刺取血 。 （ 2）新生牛血清：出生 1224小時(shí)新生牛靜脈采血 。又可細(xì)分為： ：采血后靜置自然析出的血清 。： 。：融血或微融血的血清 。 （ 3）小牛血清：出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清 。 血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但仍存在一些問(wèn)題。 胎牛血清是品質(zhì)最高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。 一、細(xì)胞培養(yǎng) (cell culture)的定義 從體內(nèi)取出細(xì)胞，在模擬體內(nèi)生理環(huán)境下（無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)條件），使細(xì)胞生存、生長(zhǎng)并維持其結(jié)構(gòu)和功能的方法。 IN VITRO:（離體的，即在容器中）用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行的實(shí)驗(yàn) IN VIVO:（在體的）完整機(jī)體內(nèi)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn) 二、細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)與不足 （一）優(yōu)點(diǎn)： 1. 長(zhǎng)時(shí)間直接觀察活細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)：細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué) …… 2. 攝影、攝電影和閉路電視等方法記錄細(xì)胞變化 3. 細(xì)胞種類廣泛：從低等生物到高等生物（人）；從胚胎到成體；從正常細(xì)胞到腫瘤細(xì)胞 4. 便于使用各種技術(shù)：相差顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、組織化學(xué)、同位素標(biāo)記等 5. 易于使用物理、化學(xué)和生物因素等進(jìn)行研究 6. 提供大量生物性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象，更經(jīng)濟(jì) （二）不足： 1. 即使模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)發(fā)展很快，但是與體內(nèi)環(huán)境相比，仍有較大差異 2. 對(duì)無(wú)菌要求高 3. 失去神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互作用：去分化、永生或惡變 三、培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)分類 （一）貼附型 這類細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)能貼附在支持物表面生長(zhǎng) 大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞呈貼附型生長(zhǎng) 只依賴于貼附才能生長(zhǎng)的細(xì)胞稱貼附性細(xì)胞 分類：成纖維型細(xì)胞（中胚層間充質(zhì)起源）、上皮型細(xì)胞（內(nèi)、外胚層起源）、游走型細(xì)胞（活躍的游走與變形運(yùn)動(dòng)）、多形型細(xì)胞（神經(jīng)細(xì)胞） （二）懸浮型 不貼附在支持物上生長(zhǎng) 呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，胞體為圓形 如某些癌細(xì)胞和血液白細(xì)胞 特點(diǎn)：生存空間大，容許長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)，能繁殖大量細(xì)胞，便于進(jìn)行細(xì)胞代謝等研究 （三）細(xì)胞凍存與復(fù)蘇 培養(yǎng)細(xì)胞在傳代過(guò)程中性質(zhì)容易發(fā)生變化，且有支原體污染的危險(xiǎn) 解決方法：細(xì)胞凍存，需要時(shí)復(fù)蘇 在培養(yǎng)液中加入冷凍保護(hù)劑（小分子：甘油、二甲亞砜），以減少細(xì)胞內(nèi)液形成冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。大分子：蔗糖、卵黃，穩(wěn)定細(xì)胞膜 復(fù)蘇：手工降溫、程序降溫儀 ——“慢凍速溶” 五、培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境 （一）無(wú)污染環(huán)境 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)毒、無(wú)菌是首要條件 人
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