研發(fā)部崗前培訓細胞培養(yǎng)-wenkub
2023-02-08 13:33:51 本頁面
【正文】 1224小時新生牛靜脈采血 。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別。 血清保存和使用須注意：血清應保存在 5℃ 至 20℃ ，若存放在 4℃ 不可超過一個月。 緩沖液 作用。 ，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。血清中含有各種血漿蛋白、多肽 、 脂肪 、 碳水化合物 、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進 細胞生長 或抑制生長活性是達到生理平衡的。含有多種生長因子，常用于體外細胞培養(yǎng)。 一、胎牛血清 各項質量指標符合 2023版 《 中華人民共和國藥典 》 第三部附錄的要求。 胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生 24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生 10－ 30天的小牛。 2. 提供結合蛋白，能識別維生素、 脂類 、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。 ，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。解凍血清時 ，應先將血清至于 28℃ 冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對不可將冷凍的血清直接放入 37℃ 水浴或者溫箱中，如放在 37℃ 解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于 20℃ 保存，避免反復凍融。有一點可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。又可細分為： ：采血后靜置自然析出的血清 。 血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。 一、細胞培養(yǎng) (cell culture)的定義 從體內取出細胞，在模擬體內生理環(huán)境下（無菌、適當溫度和一定的營養(yǎng)條件），使細胞生存、生長并維持其結構和功能的方法。 176。此時細胞質回縮，胞體呈圓球形 10分鐘 ～ 4小時 貼壁期： 細胞附著于 底物 上，游離期結束。 主要用干玻璃器皿消毒 濾 器：過濾除菌 ， 大多數培養(yǎng)用液 ， 如人工合成培養(yǎng)基 、 血清 、 酶液等均采用濾過法除菌 超凈工作臺：為細胞操作提供無菌環(huán)境 紫外燈：紫外線消毒 。成分復雜， 影響對某些實驗產物的提取和實驗結果的分析 。培養(yǎng)基內青霉素、鏈霉素最終使用濃度為每毫升 100單位 慶大霉素：每毫升 100單位，方便、廣譜、穩(wěn)定 謝 謝！ 。目前已設計出許多種培養(yǎng)基，如TC19 MEM、 RPMI16 DMEM等 合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質 優(yōu)點：標準化生產，組分和含量相對固定。 CO2培養(yǎng)箱 ? CO2培養(yǎng)箱設定的條件為 37 ℃ ， 5％ CO2 ? 使用 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)細胞時應注意的問題： ① 用螺旋口瓶培養(yǎng)細胞時，需將瓶蓋微 松，以保證通氣 ② 保持培養(yǎng)箱內空氣干凈。細胞株潛伏期一般為 6～ 24小時 對數生長期： 細胞數隨時間變化成倍增長，活力最佳，最適合進行實驗研究 停止期（平臺期）： 細胞長滿瓶壁后，細胞雖有活力但不再分裂 機制：接觸抑制、密度依賴性 細胞的生長過程 （三）氣體環(huán)境與 pH值 多數細
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