研發(fā)部崗前培訓(xùn)細(xì)胞培養(yǎng)-wenkub.com
2025-01-18 13:33 本頁面
【正文】 成本低 缺點(diǎn)：缺少某些成分，不能完全滿足體外細(xì)胞生長需要 人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清） 血清中含有： ① 多種蛋白質(zhì) （ 白蛋白 、 球蛋白 、 鐵蛋白等 ） ② 多種金屬離子 ③ 激 素 ④ 促貼附物質(zhì) ， 如纖粘蛋白 、 冷析球蛋白 、 膠 原等 ⑤ 各種生長因子 ⑥ 轉(zhuǎn)移蛋白 ⑦ 不明成分 血清質(zhì)量好壞是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵： 常用血清有胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、兔血清、馬血清等，其中以胎牛血清質(zhì)量最好 優(yōu)質(zhì)血清的標(biāo)準(zhǔn)：透明，淡黃色，無沉淀物，無細(xì)菌、支原體、病毒污染 血清的滅活（消除補(bǔ)體活性）： 56 ℃ ， 30 分鐘 血清的消毒：過濾除菌 抗菌素的使用： 在培養(yǎng)液配制后，培養(yǎng)液內(nèi)常加適量抗菌素，以抑制可能存在的細(xì)菌的生長 通常是青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用。定期消毒（ 90 ℃ ， 14 h) ③ 箱內(nèi)火菌蒸餾水 3000毫升蒸餾水槽中以 保持箱內(nèi)濕度，避兔培養(yǎng)液蒸發(fā) 純水儀 七、器械 用于解剖動(dòng)物、取材和原代培養(yǎng)切割組織等 解剖刀（剪）、鑷子、縫針（線）、持針器、止血鉗等 八、培養(yǎng)器皿 （一）玻璃瓶皿 玻璃瓶：用于配制、儲(chǔ)存培養(yǎng)液、血清等 培養(yǎng)瓶：用于培養(yǎng)細(xì)胞 培養(yǎng)皿：用于培養(yǎng)和分離細(xì)胞 吸管、離心管、燒瓶（杯）、量筒、漏斗、試管、注射器等 （二）塑料瓶皿 多孔培養(yǎng)板：適于做單細(xì)胞克隆、生長曲線測定、藥物測試和單克隆抗體等研究：分為 2 96孔板 培養(yǎng)皿： 培養(yǎng)瓶：適于在 CO2培養(yǎng)箱中使用 九、培養(yǎng)基（液） （一）平衡鹽溶液： （二）天然培養(yǎng)基：血清、組織提取液、雞 血漿等 （三）合成培養(yǎng)基 培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是維持體外細(xì)胞生存和生長的溶液，分天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基 天然培養(yǎng)基： 天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液（如雞胚和牛胚浸液） 優(yōu)點(diǎn)：營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果好 缺點(diǎn)：來源受限。飼細(xì)胞的代謝產(chǎn)物利于其它細(xì) 胞生長 （八）抑制細(xì)胞生長因素 制備培養(yǎng)基消毒不徹底：有毒物質(zhì)或微生物混入細(xì)胞生存環(huán)境中 血清滅活：能除去培養(yǎng)基中的補(bǔ)體和降低免疫球蛋白的毒性，并不損傷多肽生長因子，但可能滅活另一些有用的成分 六、細(xì)胞培養(yǎng)的設(shè)施與基本條件 實(shí)驗(yàn)用品： 超凈工作臺(tái) ， 壓力蒸汽消毒器 ， 電熱干燥箱 ， 濾器 ，酸缸 CO2培養(yǎng)箱 倒置顯微鏡 酶標(biāo)儀 、 微孔板震蕩器 液氮 罐 自動(dòng)雙重純水蒸餾器 ， 純水儀 耗 材：培養(yǎng)瓶 ， 吸管 ， 電動(dòng)吸引器 ， 培養(yǎng)板 ， 凍存管 壓力蒸汽消毒器：濕熱消毒 ， 用途廣 電熱干燥箱：干熱消毒 （ 160 ℃ ， 2小時(shí) ） 。也稱懸浮期。C 177。 胎牛血清是品質(zhì)最高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少。 （ 3）小牛血清：出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清 。 （ 2）新生牛血清：出生
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