研發(fā)部崗前培訓(xùn)細(xì)胞培養(yǎng)(已修改)
2025-01-28 13:33 本頁(yè)面
【正文】 研發(fā)部崗前培訓(xùn) 牛血清 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 中文名稱： 胎牛血清 英文名稱： fetal calf serum 定義： 采自胎牛的血清。含有多種生長(zhǎng)因子，常用于體外細(xì)胞培養(yǎng)。 一、胎牛血清 各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合 2023版 《 中華人民共和國(guó)藥典 》 第三部附錄的要求。 性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。 蛋白質(zhì)含量 %～ %（ w/v） 血紅蛋白含量 ≤ %（ w/v） 無(wú)菌檢驗(yàn) 陰性 支原體檢驗(yàn) 陰性 細(xì)菌內(nèi)毒素 ≤5（ EU/ml） 牛腹瀉病毒 陰性 大腸桿菌噬菌體 陰性 支持 細(xì)胞增殖 (Sp2/0Ag14) 生長(zhǎng)曲線 （接種濃度）最大增殖濃度 ≥ 106 個(gè) /ml 細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h 克隆率 ≥85% 血清的主要成分 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽 、 脂肪 、 碳水化合物 、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn) 細(xì)胞生長(zhǎng) 或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。 胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生 24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生 10－ 30天的小牛。 顯然，胎牛血清是品質(zhì)最高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。 功能 牛血清是 細(xì)胞培養(yǎng) 中用量最大的 天然培養(yǎng)基 ，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于 動(dòng)物細(xì)胞 的 體外培養(yǎng) ，具有極為重要的功能。 ，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。 2. 提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、 脂類 、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。 結(jié)合蛋白質(zhì) 能與有毒金屬和 熱原質(zhì) 結(jié)合，起到解毒作用。 、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。 緩沖液 作用。 ，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。 胎牛血清與小牛血清不同點(diǎn) 來(lái)源不同： 胎牛血清 (Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候 ,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛 (小牛 )血清 (Calf serum, CS)采自出生 10至 14 天的小牛。組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng)，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在 5%10%，有特殊要求的濃度在 20%。 血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在 5℃ 至 20℃ ，若存放在 4℃ 不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí) ，應(yīng)先將血清至于 28℃ 冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對(duì)不可將冷凍的血清直接放入 37℃ 水浴或者溫箱中，如放在 37℃ 解凍，顏色加深，粘稠度也會(huì)增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于 20℃ 保存，避免反復(fù)凍融。 胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別： 這三種血清的成份，總體沒(méi)有什么明顯差別，只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān)，如上述有人說(shuō)的抗體很等少。此外，
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