細胞培養(yǎng)準備工作-資料下載頁
2025-08-23 13:10本頁面
【正文】 顯微鏡下觀察：貼塊法，細胞多為合成型，肌絲減少，胞體縮小，細胞胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體、線粒體等亞細胞器逐漸增多。消化法，細胞初期表現(xiàn)為收縮型，細胞內(nèi)核位于中心，胞質(zhì)內(nèi)含豐富的肌絲及致密度體。亞細胞器少，且位于細胞邊緣處，基底膜最初未見，后來逐漸形成。傳代后，細胞逐漸轉(zhuǎn)為合成型，胞體增大且變扁平，核增大，核小體數(shù)目增加，亞細胞器也增加，肌絲開始減少，%～%,甚至更少。在生化性質(zhì)方面，收縮型細胞比合成型細胞的β極密度脂蛋白（βVLDL）對其受體結(jié)合能力強，低密度脂蛋白（LDL）分解降低，即脂質(zhì)容易在胞質(zhì)沉著。此外，像基底膜中的肝素樣物質(zhì)、膽固醇代謝等也有改變。合成型細胞內(nèi)色素C氧化還原酶成倍增加，酸性磷酸酶亦呈3～4倍增加，說明這兩類細胞不僅在形態(tài)學上，在生化、生理反應(yīng)方面也發(fā)生了較大改變。3． 細胞生長狀況的觀察：細胞計數(shù)：計數(shù)板4． 細胞活力的檢測方法：四唑鹽（MTT）比色試驗（1）：%胰蛋白酶消化（2）：加10％FCS的DMEM培養(yǎng)基（3）：96孔板（4）：MTT溶液: ( MTT. SIGMA. 250MG. 190．00.)活細胞中的琥珀酸脫氫酶還原MTT為難溶性的藍紫色結(jié)晶（5）：DMSO：二甲基亞砜溶解藍紫色結(jié)晶物（6）：酶聯(lián)免疫檢測儀：490nm處測定吸光值5． 3HTdR摻入量測定：？6．平滑肌細胞cGMP測定：？32022920
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