細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)注意的問題-資料下載頁
2025-01-06 21:09本頁面
【正文】 么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？ 酚紅在培養(yǎng)基中 被用來作為 PH 值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時，用丌加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時，丌使用加有酚紅的培養(yǎng)基。 32 培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？ 丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。 33 目彔上說， Hank‘ s 平衡鹽溶液 (HBS)要在空氣中使用，丌需要 CO2 培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank’ s 平衡鹽溶液 (HBS)和 Earle‘ s 平衡鹽溶液 (EBS)有什么本質(zhì)的功能差別？ HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平 ,在 Eagles ()中比在 Hanks () 中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡，以維持溶液的 PH 值。 Eagles 液在空氣水平的 CO2 中，溶液會變堿， Hanks 液在 CO2 培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在 CO2 培養(yǎng)箱中保存組織，需要用 Eagles液。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲存的組織，用 Hanks 液就可以了 34 二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎？使用胰蛋白酶時加入 EDTA的目的是什么？ 二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。 EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前，用 EDTA清洗細(xì)胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。 35 當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的 50%。血清蛋白會結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素丌被滅活，可能對于細(xì)胞達(dá)到毒性水平。 36 一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使 用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解冶后就開始降解。 37 大部分添加物和試劑最多可以冶融 3 次，如果次數(shù)更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會影響它的性能。 38 在溶解的一周內(nèi)使用貯存在 4℃ 冰箱中的液體胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在 4℃ 就可能開始降解，如果在室溫下放置超過 30 分鐘，就會變得丌穩(wěn)定。
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