細胞培養(yǎng)1培養(yǎng)基制備26相差顯微鏡-資料下載頁
2025-08-16 02:18本頁面
【正文】 比度增強，使我們能比較清楚的觀察到普通光學顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不清的活細胞及細胞內的某些細微結構。 相相 差差 附附 件件三、實驗程序 (一 )相差顯微鏡的使用 1. 相差顯微鏡的裝置 取下普通顯微鏡的聚光器，換上帶有環(huán)狀光相的轉盤聚光器，并將標示孔指 0(即明視野 )。取下普通物鏡，裝上相差物鏡。 2. 調焦和調光 用普通低倍物鏡在明視野中觀察，當發(fā)現(xiàn)目標后，把觀察的目的物移到視野的中央。觀察透明物體時要縮小光欄，當用相差物鏡在明視野對好焦點后，換上相應的相差物鏡，例如 20X,40x相差物鏡分別用 ph ph2標示孔的光欄，并充分開大孔徑光欄。 3. 中心調節(jié)（合軸調節(jié)） 撥出目鏡，插入中心望遠鏡，用左手固定其外筒，一邊眼看望遠鏡，一邊用右手轉動望遠鏡內筒使其升降，對準焦點后就能看到環(huán)狀光欄的亮環(huán)和相板的黑環(huán)。此時可將望遠鏡固定，微微轉動聚光器兩側的調節(jié)鈕，使兩者完全重合。如果亮環(huán)和黑環(huán)大小一不致，可升降聚光器便之一致，如果升降聚光器仍不能矯正亮環(huán)和黑環(huán)一致的話，那就是載、蓋玻片過厚的緣故。換用不同物鏡要同時更換相對應的環(huán)狀光欄，并重新合軸 。 (二 )動物活細胞的相差顯微鏡觀察 觀察蛙肝細胞裝片 ，把蛙的肝組織小塊放在載玻片上，滴上生理鹽水，分離出游離肝細胞。在相差顯微鏡下，可見折射率較高的大的球形細胞核，內含折射率更高的小顆粒 核仁。在細胞核周圍還可見到許多暗白的小顆粒即為線粒體。細胞質中還有許多大小不等明亮的細胞質顆粒。 ，放入 ， 生理鹽水洗 1次，去除上清液，用眼科剪剪碎肝組織至糊狀 ， 生理鹽水洗 1遍， 3000rpm離心 2min去上清， 加入 500微升胰蛋白酶， 37℃ 溫育 1020min，其間用 1ml槍頭吹打 23次。 500微升生理鹽水后 3000rpm離心 2min，去上清，用 200微升生理鹽水懸浮沉淀，取 50微升滴加在載玻片上，滴加一滴生理鹽水，蓋上蓋玻片后觀察。 四 . 思考題 1. 簡述相差顯微鏡與普通光學顯微鏡的差別。 2. 描述蛙肝細胞的形態(tài)特點。
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