細(xì)胞培養(yǎng)1培養(yǎng)基制備26相差顯微鏡-文庫吧
2025-08-01 02:18 本頁面
【正文】 M、 MEM、 PRMI16 M19 Ham’ s/F12等 血清的種類 胎牛血清：剖腹產(chǎn)的胎牛 牛血清 新生牛血清：出生 24h之內(nèi)的新生牛 小牛血清：出生 10～ 30d的小牛 （人血清、馬血清、羊血清、雞血清） 血清的主要成分及主要作用 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成，血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長活性是達(dá)到生理平衡的。 血 清 血清的主要作用 ? 提供基本營養(yǎng)物質(zhì) ? 提供貼壁和擴(kuò)展因子（ FN、 LN） ? 提供激素及各種生長因子 （ FGF、 EGF、 PDGF) ? 提供結(jié)合蛋白 ? 對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞提供某些保護(hù)作用 血清的使用與儲(chǔ)存 ? 使用前的處理 56℃ 滅活 30min → 去除補(bǔ)體 (可促進(jìn)細(xì)胞溶 解 )成分 , ? 儲(chǔ)存條件 滅活后分裝成小包裝（ 10mL、 20mL、 50mL）， － 20 ℃ 儲(chǔ)存；使用前 4 ℃ 融化。 ? 使用濃度 一般為 2％～ 20％，最常用的是 10％。 影響細(xì)胞生長的因素 溫度 一般哺乳類及禽類細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度 37～38℃ ，溫度過高或過低都會(huì)影響到細(xì)胞的生長。 溫度對(duì)細(xì)胞生長的影響 二氧化碳（ CO2） ? 大多數(shù)細(xì)胞適于在 pH ～ ，低于 pH 或高于 pH ，甚至造成細(xì)胞退化或死亡。 ? 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要求有 5%的 CO2，這是為了維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。因?yàn)榕囵B(yǎng)基中使用的是 HCO3CO32緩沖對(duì)，環(huán)境中穩(wěn)定的 CO2可以保持培養(yǎng)基處在 pH7左右。 ? 羥乙基哌嗪乙硫磺酸（ Hepes）：對(duì)細(xì)胞無毒性，也不起緩沖作用，主要作用是防止 pH迅速變動(dòng)，在開瓶通氣培養(yǎng)或活細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的 pH值。 培養(yǎng)細(xì)胞的生長方式和類型 粘附型細(xì)胞： 附著在某一固相支持物表面才 能生長的細(xì)胞 。
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