動物細(xì)胞培養(yǎng)-文庫吧
2025-07-21 04:10 本頁面
【正文】 酶處理 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶 單個細(xì)胞 加培養(yǎng)液稀釋 分 瓶 原代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)特點： 細(xì)胞貼壁、接觸抑制 動物胚胎或幼齡動物的組織、器官 配置細(xì)胞懸液 胰蛋白酶處理 10代細(xì)胞 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶 4050代細(xì)胞 傳代培養(yǎng) 無限傳代 單個細(xì)胞 加培養(yǎng)液稀釋 傳代 10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)不改變， 保持正常二倍體核型。 分 瓶 繼續(xù)傳代培養(yǎng) 少部分 細(xì)胞 獲得不 死性，細(xì)胞突變，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變， 等同于癌細(xì)胞。 細(xì)胞株：一般說遺傳物質(zhì)未改變 細(xì)胞系：遺傳物質(zhì)已改變 原代培養(yǎng) 動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理：細(xì)胞增殖 為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？ 因為其細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)，分化程度低。 為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞？ 擴(kuò)大細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸面積，利與細(xì)胞吸收營養(yǎng)。 10代以內(nèi)的細(xì)胞遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。 目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在 10代以內(nèi)，為什么？ 動物細(xì)胞培養(yǎng) 能否像 綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？ 不能，動物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體。 1）無菌、無毒的環(huán)境： 適宜的溫度： 人和哺乳動物細(xì)胞最適溫度為 177。 ℃ 適宜的酸堿度： PH： 液體合成培養(yǎng)基： （ 葡萄糖 、 氨基酸）、促生長因子、（水、無機(jī)鹽、微量元素）等；通常還需加 血漿、血清等 天然成分。 4）氣體環(huán)境： 2）營養(yǎng)： 3）溫度和 pH： “ 95％空氣 +5％ CO2” 的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的； CO2維持培養(yǎng)液的 pH。 對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具 無菌處理； 培養(yǎng)液中 添加抗生素 防止培養(yǎng)過程中污染； 定期更換培養(yǎng)液 以清除代謝產(chǎn)物，防止對培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。 動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較 植物組培 培養(yǎng)基有何獨特之處？ 主要成分： 葡萄糖 、氨基酸、水、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。 獨特之處有： 加入動物血清原因： 提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境； 含營養(yǎng)物質(zhì) （如生長因子） 促進(jìn)細(xì)胞發(fā)育。 用 胰蛋白酶分散細(xì)胞 ，說明細(xì)胞間物質(zhì)主要成分是什么？ 用胃蛋白酶行嗎？ 在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明 細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。 動物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的 PH為 — ，此環(huán)境下胃蛋白酶（ ）沒有活性，而胰蛋白酶 ()的活性較高
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