【正文】 、 100ml、250 ml藍蓋瓶，15ml,50ml 塑料離心管、 0． 22 μm的微孔濾膜、 50ml一次性注射器，超純水，小牛血清，干粉合成培養(yǎng)基 (DMEM)，雙抗（青霉素 鏈霉素），NaHC03。為了觀察活細胞的顯微結構，就需要使用相差顯微鏡。細胞質(zhì)中還有許多大小不等明亮的細胞質(zhì)顆粒。換用不同物鏡要同時更換相對應的環(huán)狀光欄，并重新合軸 。 4℃ 冰箱保存。因而含有 L－谷氨酰胺的培養(yǎng)基不能用高壓滅菌的方式除菌。 血 清 血清的主要作用 ? 提供基本營養(yǎng)物質(zhì) ? 提供貼壁和擴展因子（ FN、 LN） ? 提供激素及各種生長因子 （ FGF、 EGF、 PDGF) ? 提供結合蛋白 ? 對培養(yǎng)中的細胞提供某些保護作用 血清的使用與儲存 ? 使用前的處理 56℃ 滅活 30min → 去除補體 (可促進細胞溶 解 )成分 , ? 儲存條件 滅活后分裝成小包裝（ 10mL、 20mL、 50mL）， － 20 ℃ 儲存；使用前 4 ℃ 融化。 細胞培養(yǎng)（ cell culture) 是指用機械或化學的方法將組織分散成單個細胞而進行的培養(yǎng)。因為培養(yǎng)基中使用的是 HCO3CO32緩沖對，環(huán)境中穩(wěn)定的 CO2可以保持培養(yǎng)基處在 pH7左右。 實驗步驟 DMEM培養(yǎng)基的配制 1． 稱量一定量的DMEM干粉，倒入1000ml燒杯中，加入950ml 去離子水，用磁力攪拌至充分溶解，然后加入適量 NaHCO3，溶解后先加入 10ml 雙抗（ 100unit青霉素 ,100ug/ml鏈霉素，最后加 水 1000ml，分裝到 4個 250ml燒杯中。 ?相差顯微鏡是一種將光線通過透明標本細節(jié)時所產(chǎn)生的光程差（即相位差）轉(zhuǎn)化為光強差的特種顯微鏡。 ，放入 ， 生理鹽水洗 1次，去除上清液，用眼科剪剪碎肝組織至糊狀 ， 生理鹽水洗 1遍， 3000rpm離心 2min去上清， 加入 500微升胰蛋白酶， 37℃ 溫育 1020min，其間用 1ml槍頭吹打 23次。如果亮環(huán)和黑環(huán)大小一不致，可升降聚光器便之一致，