細(xì)胞培養(yǎng)1培養(yǎng)基制備26相差顯微鏡(更新版)
【正文】 盤聚光器，并將標(biāo)示孔指 0(即明視野 )。 (二 )動(dòng)物活細(xì)胞的相差顯微鏡觀察 觀察蛙肝細(xì)胞裝片 ，把蛙的肝組織小塊放在載玻片上，滴上生理鹽水，分離出游離肝細(xì)胞。 。在細(xì)胞核周圍還可見(jiàn)到許多暗白的小顆粒即為線粒體。 2. 調(diào)焦和調(diào)光 用普通低倍物鏡在明視野中觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)目標(biāo)后，把觀察的目的物移到視野的中央。 實(shí)驗(yàn)八 活細(xì)胞觀察及相差顯微鏡的使用 ? 人的眼睛只在光的波長(zhǎng) (顏色 )和振幅(亮度 )變化時(shí)才能觀察到被檢的物體，而活細(xì)胞或末經(jīng)染色標(biāo)本多為無(wú)色透明，當(dāng)光波被通過(guò)時(shí)，其波長(zhǎng)和振幅并沒(méi)發(fā)生什么變化，所以無(wú)法辨認(rèn)。貼上標(biāo)簽。另一種是含有 L－谷氨酰胺，配制的同時(shí)在添加NaCO3，這類培養(yǎng)基不能用高壓滅菌德的方式除菌，只能采用過(guò)慮除菌的方式。 密度依賴性 細(xì)胞接種密度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖。 溫度對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響 二氧化碳（ CO2） ? 大多數(shù)細(xì)胞適于在 pH ～ ，低于 pH 或高于 pH ，甚至造成細(xì)胞退化或死亡。 ? 傳代培養(yǎng)（ passage culture）： 將細(xì)胞以一個(gè)培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個(gè)培養(yǎng)瓶即稱為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)（ cell culture) 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是選用各種細(xì)胞的最佳生存條件對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù)。 細(xì)胞培養(yǎng)常用術(shù)語(yǔ) ? 原代培養(yǎng)（ primary culture）： 從直接取自生物體細(xì)胞、組織或器官開(kāi)始的培養(yǎng)。 影響細(xì)胞生長(zhǎng)的因素 溫度 一般哺乳類及禽類細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度 37～38℃ ，溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)。細(xì)胞在接種后很快便可見(jiàn)到細(xì)胞伸出偽足附著，與支持物形成一些接觸點(diǎn)，接著細(xì)胞逐漸呈扁平或放射狀伸展，逐漸形成上皮型或成纖維型或其他類型生長(zhǎng)。市售培養(yǎng)基可分為兩種：一是可進(jìn)行高壓滅菌的培養(yǎng)基，這類培養(yǎng)基不含 L－谷氨酰胺和 NaCO3，須滅菌后再添加 L－谷氨酰胺和 NaCO3。過(guò)濾全部結(jié)束后，將藍(lán)蓋瓶蓋緊。 2. 比較活細(xì)胞與固定后細(xì)胞的形態(tài)差異 。取下普通物鏡，裝上相差物鏡。在相差顯微鏡下，可見(jiàn)折射率較高的大的球形細(xì)胞核，內(nèi)含折射率更高的小顆粒
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