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第6章-微生物的營養(yǎng)-資料下載頁

2025-08-16 01:31本頁面
  

【正文】 。 ? 由于各類微生物所需營養(yǎng)不同,所以培養(yǎng)基的種類也很多。 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的方法: 生態(tài)模擬 參閱文獻(xiàn) 精心設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)比較 1 培養(yǎng)基類型 ( 1)按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解作分類 ( 2)按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)分類 ( 3)按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能分類 (1)按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解分類 ? 天然培養(yǎng)基: 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、豆芽汁、馬鈴薯 ,營養(yǎng)成分豐富,可滿足多種微生物生長的需要。 ? 合成培養(yǎng)基: NaCl,K2HPO4,成分確定,可用來進(jìn)行精確實(shí)驗(yàn) 。 ? 半合成培養(yǎng)基: (2)按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)分類 ? 固體培養(yǎng)基: %~ % 的凝固劑,用于微生物的純化分離等研究 ? 半固體培養(yǎng)基: %凝固劑,用來研究細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性、生理特征。 ? 液體培養(yǎng)基:用來進(jìn)行各種生理研究,及培養(yǎng)大量菌體。 ? 瓊脂的特性:無毒,可利用,良好的凝固溫度。 (3)按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能分類 ? 加富培養(yǎng)基 ? 選擇培養(yǎng)基 ? 鑒別培養(yǎng)基 2 培養(yǎng)基配制原則 (1)制定合理的試驗(yàn)方案 (2)選擇適宜的營養(yǎng)物 (3)控制適宜的理化因子 (4)選擇價(jià)廉易得原料 (5)采取適宜的滅菌方法 (1)制定合理的試驗(yàn)方案 ? 根據(jù)微生物的營養(yǎng)需要 ? 根據(jù)微生物的營養(yǎng)類型 ? 根據(jù)微生物的營養(yǎng)要求 (2)選擇適宜的營養(yǎng)物 ? 營養(yǎng)物的濃度和配比 (3)控制適宜的理化因子 ? pH:調(diào)節(jié)適宜的 pH值 常用的緩沖劑:磷酸緩沖劑、 CaCO3 ? 滲透壓和水活度 ? 氧化還原勢(shì) (4)選擇價(jià)廉易得原料 ? 以粗代精 ? 以野代家 ? 以廢代好 ? 以簡(jiǎn)代繁 ? 以氮代朊 ? 以纖代糖 ? 以烴代糧 ? 以國代進(jìn) (5)采取適宜的滅菌方法 實(shí)踐中常采取加壓蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,一般培養(yǎng)基用 ( 121℃ )維持 15~30min可達(dá)到滅菌目的。但在加壓蒸汽滅菌過程中,長時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此對(duì)含糖培養(yǎng)基常在 kg/cm2( 112℃ )滅菌 15~30min。 獲得純培養(yǎng)的方法 微生物學(xué)的一項(xiàng)重要的基本技術(shù)就是純培養(yǎng)技術(shù),要研究微生物,必須把混雜的微生物類群分離開,以得到只含一種微生物的培養(yǎng)。從一個(gè)細(xì)胞得到的后代稱為純培養(yǎng),獲得純培養(yǎng)有不同方法。 1. 稀釋平板法 ? (參見實(shí)驗(yàn)部分稀釋平板計(jì)數(shù)法 ) ? 取稀釋到一定濃度的樣品倒平板或涂平板,待培養(yǎng)一定時(shí)間后,平板上生長出的單菌落可能是由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來。挑取此單菌落重復(fù)以上操作數(shù)次,就可得到純培養(yǎng)。 ? 用接種環(huán)沾取少許樣品,在已凝固的培養(yǎng)基表面連續(xù)劃過,方式有平行、扇形、連續(xù)劃線。由于接種環(huán)連續(xù)移動(dòng),可以逐漸分散細(xì)菌,以形成單菌落,重復(fù)數(shù)次,即可得到純培養(yǎng)。 3. 利用選擇培養(yǎng)基分離 ? 不同細(xì)菌需要不同的營養(yǎng)物質(zhì)和生長條件,可以針對(duì)要分離的微生物的特點(diǎn)。提供適合其生長的條件,而限制其他微生物的生長,使得要分離的微生物占優(yōu)勢(shì),然后進(jìn)一步純化。 滅菌、消毒的方法 ? 煮沸法: 100℃ , 30~ 60min。 ? 巴氏消毒法 : 方法 63~ 65℃ , 3Omin,或 70℃ , l5min 適用 風(fēng)味飲料及不耐熱的營養(yǎng)細(xì)胞。 ? 間歇滅菌法: 方法 100℃ , 15~ 3Omin 室溫過夜 (殘留芽胞萌發(fā)) 100℃ , 15~ 30min…重復(fù) 3次,可殺滅所有微生物。 適用 不耐熱的藥品、營養(yǎng)成分、特殊培養(yǎng)基,或缺乏高壓滅菌鍋時(shí)。 ? 高壓蒸汽滅菌:方法 121℃ , 20min。 適用 一般培養(yǎng)基、液體、固體、器具等。 ? 干熱滅菌:灼燒法 干燥箱滅菌法: 160~ 180℃ , 1~ 2h。
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