蛋白質(zhì)溶液的濃縮方法-資料下載頁(yè)
2025-08-16 00:27本頁(yè)面
【正文】 1～ 14都是穩(wěn)定的，且能在 90℃下正常工作。 ? 超濾膜通常是比較穩(wěn)定的，若使用恰當(dāng)，能連續(xù)用 1～ 2年。暫時(shí)不用，可浸在 1％甲醛溶液或 ％ 疊氮化鈉 NaN3中保存。 33 超濾膜 相對(duì)流速 (ml/min/cm2) 性能特點(diǎn) 聚醚砜 ， pH范圍 1 ~ 14 3,000 MWCO 肽的回收率高 5,000 MWCO 肽的回收率高，流速較快 10,000 MWCO 應(yīng)用范圍廣，流速快，吸附低 30,000 MWCO 應(yīng)用范圍廣，流速快 50,000 MWCO 精確的截留分子量限 100,000 MWCO 免疫球蛋白的收率高 三醋酸纖維素 ， pH范圍 4 ~ 8 5,000 MWCO 去除肽和蛋白 10,000 MWCO 微小組分，游離 /結(jié)合藥物研究 20,000 MWCO 樣品清洗， HPLC樣品制備 再生纖維素 ， pH范圍 3 ~ 11 10,000 MWCO 微克量蛋白質(zhì)的高效回收 30,000 MWCO 免疫球蛋白的快速和高效回收 100,000 MWCO 蛋白質(zhì)梯度分離 Hydrosart， pH范圍 3 ~ 11 5,000 MWCO 稀釋液的高效回收 10,000 MWCO 流速快，收率高，吸附低 30,000 MWCO 免疫球蛋白的收率高 超濾膜的選擇 34 超濾膜的選擇 不同截留分子量 (MWCO)的超濾膜選擇指南 應(yīng)用 /分子量 5,000 10,000 30,000 50,000 100,000 酶 X X 生長(zhǎng)因子 X X 免疫球蛋白 X X X 單克隆抗體 X X X 肽 X 35 注意事項(xiàng) 料液流速 溫度 操作壓力 影響因素 進(jìn)料濃度 運(yùn)行周期 料液的 預(yù)處理 膜的清洗 洗脫量 超濾膜 孔徑大小 36 注意事項(xiàng) ? 提高超濾收率方法（樣品在微克級(jí)別）： （ 1） 根據(jù)樣品處理量，選擇最小可用的超濾容器，在小容器中反復(fù)添加樣品，反復(fù)超濾。 （ 2）在適量范圍內(nèi)，選截留分子量最低的超濾膜。 （ 3）如可能，使用水平轉(zhuǎn)頭代替角轉(zhuǎn)頭離心，這樣可減少在離心過(guò)程中溶液與離心管接觸的表面積。 （ 4）將壓力或離心力降低到大約最大推薦數(shù)值的一半。 （ 5）避免過(guò)度濃縮，最終體積越小，越難得到完全回收，如可能，在第一次回收后，用一滴或多滴緩沖液潤(rùn)洗容器，然后再次回收。 （ 6）用溶于蒸餾水中的 5%SDS、 Tween 20或 Triton X預(yù)先浸泡超濾容器過(guò)夜，然后在使用前徹底潤(rùn)洗 . 37 小結(jié)與展望 近來(lái)，對(duì)于蛋白質(zhì)的濃縮技術(shù)的發(fā)展，多著重于提高相關(guān)器材的性能，或者同時(shí)結(jié)合幾種方法，濃縮效率得到了提高，但仍不能滿足科研人員和企業(yè)生產(chǎn)的要求。希望今后科學(xué)工作者們能夠找出更多更好的方法，以有利于蛋白質(zhì)更深更進(jìn)一步的研究，為人類(lèi)對(duì)生命的探索奠定好基礎(chǔ)，解決人類(lèi)生命的重大問(wèn)題。 38 THANK YOU
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