生物化學(xué)習(xí)題及答案-資料下載頁(yè)
2025-08-05 09:15本頁(yè)面
【正文】 從而阻斷蛋白質(zhì)顆粒的相互聚集，防止溶液中蛋白質(zhì)的沉淀析出。（2）同種電荷：在pH≠pI的溶液中，蛋白質(zhì)帶有同種電荷。若pH＞pI，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷；若pHpI，蛋白質(zhì)帶正電荷。同種電荷相互排斥，阻止蛋白質(zhì)顆粒相互聚集而發(fā)生沉淀。沉淀蛋白質(zhì)的方法，常用的有：（1）鹽析法，在蛋白質(zhì)溶液加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽，去除蛋白質(zhì)的水化膜，中和蛋白質(zhì)表面的電荷，使蛋白質(zhì)顆粒相互聚集，發(fā)生沉淀。用不同濃度的鹽可以沉淀不同的蛋白質(zhì)，稱分段鹽析。鹽析是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行粗分離的常用方法。（2）有機(jī)溶劑沉淀法：使用丙酮沉淀時(shí)，必須在0～ 4℃ 低溫下進(jìn)行，丙酮用量一般10倍于蛋白質(zhì)溶液的體積，蛋白質(zhì)被丙酮沉淀時(shí)，應(yīng)立即分離，否則蛋白質(zhì)會(huì)變性。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。此外，還可用加重金屬鹽，加某些有機(jī)酸，加熱等方法將樣品中的蛋白質(zhì)變性沉淀?！ ?.（1）能提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。亞基結(jié)合可以減少蛋白質(zhì)的表面積/體積比，使蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性增高。（2）提高遺傳物質(zhì)的經(jīng)濟(jì)性和有效性。編碼一個(gè)能裝配成同聚體的單位所需的基因長(zhǎng)度比編碼一個(gè)與同聚體相同相對(duì)分子質(zhì)量的超長(zhǎng)肽鏈所需的基因長(zhǎng)度要小得多（如煙草花葉病毒的外殼有2130多個(gè)亞基）。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的單體相互聚集可以形成新的功能部位。（4）形成協(xié)同效應(yīng)。寡聚蛋白與配體相互作用時(shí)，有可能形成類(lèi)似血紅蛋白或別構(gòu)酶那樣的協(xié)同效應(yīng)，使其功能更加完善。有些寡聚蛋白的不同亞基可以執(zhí)行不同的功能，如一些酶的亞基可分為催化亞基和調(diào)節(jié)亞基?！ ?.（1）pH值增加，Hb與氧的親和力增加。（2）CO2分壓增加，Hb與氧的親和力下降。（3）O2分壓下降，Hb與氧的親和力下降。（4）2，3DPG濃度下降，Hb與氧的親和力增加。（5）α2β2解聚成單個(gè)亞基，Hb與氧的親和力增加?！ ?.（1）由于2，3BPG是同脫氧Hb A中心空隙帶正電荷的側(cè)鏈結(jié)合，而脫氧Hb F缺少帶正電荷的側(cè)鏈，因此2，3BPG是同脫氧Hb A的結(jié)合比同脫氧Hb F的結(jié)合更緊。（2）2，3BPG穩(wěn)定血紅蛋白的脫氧形式，降低血紅蛋白的氧飽和度。由于Hb F同 2，3BPG親和力比Hb A低，HbF受血液中2，3BPG影響小，因此Hb F在任何氧分壓下對(duì)氧的親和力都比Hb A大，（3）親和力的這種差別允許氧從母親血向胎兒有效轉(zhuǎn)移?！ ?.（1）α螺旋：右手螺旋，；任一個(gè)氨基酸殘基的亞氨基均與其后第四個(gè)氨基酸殘基的羰基形成氫鍵，氫鍵與螺旋軸基本平行，氫鍵封閉的原子為13個(gè)，；肽平面維持剛性結(jié)構(gòu)，側(cè)鏈伸向外側(cè)，原子之間堆積緊密，螺旋內(nèi)基本無(wú)空隙，因此結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。（2）β折疊：多肽鏈充分伸展，各肽鍵平面之間折疊成鋸齒狀結(jié)構(gòu)，側(cè)鏈R基團(tuán)交錯(cuò)位于鋸齒狀結(jié)構(gòu)的上下方；兩條以上肽鍵或一條肽鍵內(nèi)的若干肽段平行排列，靠肽鍵羰基氧和亞氨基氫形成氫鍵維系，使構(gòu)象穩(wěn)定；兩條肽鍵走向相同或相反。(3）β轉(zhuǎn)角：在球狀蛋白質(zhì)分子中，肽鏈主鏈常常會(huì)出現(xiàn)180186。回折，回折部分成為β轉(zhuǎn)角，在β轉(zhuǎn)角中第一個(gè)殘基的C=O與第四個(gè)殘基的NH形成氫鍵，使β轉(zhuǎn)角成為比較穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。 ，氫鍵等次級(jí)鍵被破壞，蛋白質(zhì)分子就從原來(lái)有秩序卷曲的緊密結(jié)構(gòu)變?yōu)闊o(wú)秩序的松散伸展?fàn)罱Y(jié)構(gòu)。即二、三級(jí)以上的高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)發(fā)生改變或破壞，但一級(jí)結(jié)構(gòu)沒(méi)有破壞。變性后，蛋白質(zhì)的溶解度降低，是由于高級(jí)結(jié)構(gòu)受到破壞，使分子表面結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，親水基團(tuán)相對(duì)減少，容易引起分子間相互碰撞發(fā)生聚集沉淀，蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能喪失，由于一些化學(xué)鍵的外露，使蛋白質(zhì)的分解更加容易?！ ?0.（1）在低pH值時(shí)，羧基質(zhì)子化，蛋白質(zhì)分子帶有大量的凈正電荷，分子內(nèi)正電荷相斥使許多蛋白質(zhì)變性，蛋白質(zhì)分子內(nèi)部疏水基團(tuán)因此而向外暴露，使蛋白質(zhì)溶解度降低，因而產(chǎn)生沉淀。（2）加入少量鹽時(shí)，對(duì)穩(wěn)定帶電基團(tuán)有利，增加了蛋白質(zhì)的溶解度。但是隨著鹽離子濃度的增加，鹽離子奪取了與蛋白質(zhì)結(jié)合的水分子，降低了蛋白質(zhì)的水合程度。使蛋白質(zhì)水化層破壞，從而使蛋白質(zhì)沉淀。（3）在等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)分子之間的靜電斥力最小，所以其溶解度最小。（4）加熱會(huì)使蛋白質(zhì)變性，蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水基團(tuán)被暴露，溶解度降低，從而引起蛋白質(zhì)沉淀。（5）非極性溶劑減小了表面極性基團(tuán)的溶劑化作用，使蛋白質(zhì)分子與水之間的氫鍵減少，促使蛋白質(zhì)分子之間形成氫鍵，蛋白質(zhì)的溶解度因此而降低。（6）介電常數(shù)的下降對(duì)暴露在溶劑中的非極性基團(tuán)有穩(wěn)定作用，促使蛋白質(zhì)肽鏈的展開(kāi)而導(dǎo)致變性?！ 。z顆粒排阻Mr較大的蛋白質(zhì)，僅允許Mr較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒內(nèi)部，所以Mr較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠顆粒之間的空隙中通過(guò)，可以用較小體積的洗脫液從層析柱中洗脫出來(lái)。而Mr小的蛋白質(zhì)必須用較大體積的洗脫液才能從層析柱中洗脫出來(lái)。SDS PAGE分離蛋白質(zhì)時(shí)，所有的蛋白質(zhì)均要從凝膠的網(wǎng)孔中穿過(guò)，蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量越小，受到的阻力也越小，移動(dòng)速度就越快?！ 。f(shuō)明該蛋白質(zhì)含有2個(gè)色氨酸殘基，若色氨酸百分含量的測(cè)定值準(zhǔn)確，則牛血清蛋白較準(zhǔn)確的相對(duì)分子質(zhì)量為：35172＝70344
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1