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第二章蛋白質(zhì)化學(xué)-資料下載頁(yè)

2025-08-01 13:07本頁(yè)面
  

【正文】 ialysis)。 鹽析法 :在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的硫酸銨、氯化鈉等中性鹽,可有效地破壞蛋白質(zhì)顆粒的水化層。同時(shí)又中和了蛋白質(zhì)表面的電荷,從而使蛋白質(zhì)顆粒集聚而生成沉淀,這種現(xiàn)象稱為鹽析( salting out)。 蛋白質(zhì)的沉淀 如果加入適當(dāng)?shù)脑噭┦沟鞍踪|(zhì)分子處于等電點(diǎn)狀態(tài)或失去水化層 ( 消除相同電荷 , 除去水膜 ) , 蛋白質(zhì)膠體溶液就不再穩(wěn)定并將產(chǎn)生沉淀 。 沉淀方法類別 : 高濃度中性鹽 ( 鹽析 、 鹽溶 ) 酸鹼 ( 等電點(diǎn)沉淀 ) 有機(jī)溶劑沉淀 重金屬鹽類沉淀 生物堿試劑和某些酸類沉淀 加熱變性沉淀 蛋白質(zhì)變性與復(fù)性 ● 蛋白質(zhì)各自所特有的高級(jí)結(jié)構(gòu) , 是表現(xiàn)其物理性質(zhì)和化學(xué)特性以及生物學(xué)功能的基礎(chǔ) 。 當(dāng)天然蛋白質(zhì)受到某些物理因素和化學(xué)因素的影響 , 使其分子內(nèi)部原有的高級(jí)構(gòu)象發(fā)生變化時(shí) , 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物學(xué)功能都隨之改變或喪失 , 但并未導(dǎo)致其一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化 , 這種現(xiàn)象稱為 變性作用 ( denaturation) 。 表征 :生物活性喪失;物理性質(zhì) ( 溶解度 、 粘度 、 擴(kuò)散系數(shù) 、 光譜特性等 )和化學(xué)性質(zhì) ( 化學(xué)反應(yīng) , 被酶解性 ) 改變 應(yīng)用 :變性滅菌 、 消毒;變性制食品;抗衰老 …… ● 蛋白質(zhì)的變性作用如果不過(guò)于劇烈 , 則是一種可逆過(guò)程 , 變性蛋白質(zhì)通常在除去變性因素后 , 可緩慢地重新自發(fā)折疊成原來(lái)的構(gòu)象 , 恢復(fù)原有的理化性質(zhì)和生物活性 , 這種現(xiàn)象成為 復(fù)性 ( renaturation) 。 蛋白質(zhì)主要呈色反應(yīng) 雙縮脲反應(yīng) 酚試劑反應(yīng) → 蛋白質(zhì)定量 、 定性 茚三酮反應(yīng) 測(cè)定常用方法 雙縮脲反應(yīng) 蛋白質(zhì)在堿性溶液中也能與硫酸銅發(fā)生相同反應(yīng),產(chǎn)生紅紫色絡(luò)合物 紅紫色絡(luò)合物 (鹼性溶液 ) Cu2+ 蛋白質(zhì)的紫外吸收光譜 蛋白質(zhì)在遠(yuǎn)紫外光區(qū) ( 200230nm) 有較大的吸收 , 在 280nm有一特征吸收峰 , 可利用這一特性對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性定量鑒定 。 蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度 /( mg/ml) = 280 260 測(cè)定范圍: ~ 簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)分類 結(jié)合蛋白質(zhì)分類 問(wèn)答題和計(jì)算題 為什麼說(shuō)蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)最重要的物質(zhì)基礎(chǔ) ? 試比較 Gly、 Pro與其它常見(jiàn)氨基酸結(jié)構(gòu)的異同 , 它們對(duì)多肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成有何影響 ? 試舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 ( 包括一級(jí)結(jié)構(gòu) 、 高級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 ) 。 為什么說(shuō)蛋白質(zhì)水溶液是一種穩(wěn)定的親水膠體 ? 什麼是蛋白質(zhì)的變性 ? 變性的機(jī)制是什麼 ? 舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)變性在實(shí)踐中的應(yīng)用 。 已知某蛋白質(zhì)的多肽鏈的一些節(jié)段是 ?螺旋 , 而另一些節(jié)段是 ?折疊 。 該蛋白質(zhì)的分子量為 240 000, 其分子長(zhǎng) ?105,求分子中 ?螺旋和 ?折疊的百分率 。 (蛋白質(zhì)中一個(gè)氨基酸的平均分子量為 120) 名詞解釋 等電點(diǎn) ( pI) 肽鍵和肽鏈 肽平面及二面角 一級(jí)結(jié)構(gòu) 二級(jí)結(jié)構(gòu) 三級(jí)結(jié)構(gòu) 四級(jí)結(jié)構(gòu) 超二級(jí)結(jié)構(gòu) 結(jié)構(gòu)域 蛋白質(zhì)變性與復(fù)性 分子病 肽 課堂練習(xí)答案 相同 :雖然二者在組成上差異很大 ,但在構(gòu)成方式上卻很相似 ,主要表現(xiàn)在①都是由基本結(jié)構(gòu)單位通過(guò)特定的共價(jià)鍵連接而成的大分子,②各自的主鏈都是不變成分,可變成分在側(cè)鏈上。 相異 : 比較項(xiàng)目 蛋白質(zhì) 核酸 基本結(jié)構(gòu)單位 20種氨基酸 4種(脫氧)核苷酸 連接的鍵 肽鍵 3ˊ, 5ˊ磷酸二酯鍵 主鏈的組成 由 NC?CO 由戊糖 +磷酸 (不變成分) 反復(fù)循環(huán)組成 反復(fù)循環(huán)組成 側(cè)鏈 20種 AA殘基的 核苷酸的 4種 (可變成分) R側(cè)鏈排列組合 堿基排列組合 基本結(jié)構(gòu)單位通式 H2NCHCOOH R H2PO3OH2C (O)H HO N 試比較核酸、蛋白質(zhì) 一級(jí)結(jié)構(gòu) 的異同,寫出各自 基本結(jié)構(gòu)單位 的通式 簡(jiǎn)述研究核酸、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的意義。 生物的遺傳信息儲(chǔ)存于 DNA的核苷酸序列中,蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是由相應(yīng)的 DNA序列決定的,每一種蛋白質(zhì)分子所具有的特定的一級(jí)結(jié)構(gòu)又決定了其高級(jí)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能,也就表現(xiàn)出特定的生命現(xiàn)象。因此,研究核酸、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)可破譯生命的密碼,是在分子水平認(rèn)識(shí)生命的突破口。
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