納米粒子介導(dǎo)血管緊張素ii的1型受體相關(guān)蛋白對大鼠血管內(nèi)膜-資料下載頁
2025-07-21 04:31本頁面
【正文】 16天后分別切取標(biāo)本，用于基因轉(zhuǎn)染 \ 率的觀察、免疫組織化學(xué)染色及 mRNA的檢測。 免疫組織化學(xué)染色用于觀察血管形態(tài)學(xué)的變化、 PCNA、 TUNEL、 MCP TNFa、 IL IL6等在 血管組織中的變化。 Northern Blot分析 bax、 bcl bcl xLmRNA及 MCP TNFa、 IL IL6mRNA的變化。 觀察指標(biāo)： 納米粒子介導(dǎo)的 ATRAP的轉(zhuǎn)染效率（已有部分預(yù) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果）。 血管形態(tài)學(xué)的變化 (測量軟件購置于 Densitograph, ATTO Corporation)。 PCNA用于測定細(xì)胞增生情況。 TUNEL測定 (terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) mediated dUTP nick endlabeling, 末端脫氧核甘酸轉(zhuǎn)移酶 ) （ MEBSTAIN 凋亡試劑盒 II）。 免疫組織化學(xué)染色觀察 ATRAP對炎性細(xì)胞因子的 抑制作用。 bax、 bcl bcl xLmRNA的表達(dá)。 MCP TNFa、 IL IL6mRNA的表達(dá)。 四、 ATRAP基因試劑的初步研究 在被氣囊導(dǎo)管損傷后的大鼠頸動脈壁外局部轉(zhuǎn) 染在生物蛋白膠或懸浮液內(nèi)的納米粒子介導(dǎo)的 ATRAP，因納米粒子可以穿透血管壁，觀察納米粒 子 ATRAP在不同時(shí)間及濃度的轉(zhuǎn)染率及對血管內(nèi) 膜增生的抑制作用。 技術(shù)路線： 雄性 12周齡的 SD大鼠被用于本實(shí)驗(yàn)。 2F氣囊導(dǎo)管造成大鼠頸動脈壁損傷。 將不同濃度的納米粒子 ATRAP懸浮液或在生物蛋 白膠中，涂抹在局部損傷的血管外，縫合皮膚切口。 16天后分別切取標(biāo)本，分別觀察 ATRAP 的轉(zhuǎn)染率及增生內(nèi)膜的變化情況。 觀察指標(biāo)： 納米粒子介導(dǎo)的 ATRAP基因制劑的轉(zhuǎn)染效率 ，觀察最佳給藥途徑、時(shí)間及藥物濃度。 納米粒子 ATRAP對血管形態(tài)學(xué)的變化的影響 (測量軟件購置于 Densitograph, ATTO Corporation)。 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 預(yù)實(shí)驗(yàn)初步顯示 PLGA介導(dǎo)的 ATRAP有較好的穩(wěn)定性，釋放時(shí)間約 1014天可到達(dá)平臺期，也已初步在大鼠血管內(nèi)膜及中膜 VSMC內(nèi)觀察到納米粒子轉(zhuǎn)染后 ATRAP的 mRNA及其蛋白產(chǎn)物的表達(dá)。 納米粒子轉(zhuǎn)染后 ATRAP的 mRNA 及其蛋白產(chǎn)物的表達(dá) 熒光顯微鏡下所見大鼠血管壁上 VSMC內(nèi)納米粒子轉(zhuǎn)染 ATRAP基因的表達(dá) 免疫組化顯示在內(nèi)膜及中膜層的 VSMC內(nèi)可見 ATRAP表達(dá) Chin Med Sci J. 2022。22:2226, Chin Med Sci J. 2022。24(2):9196 研究目標(biāo) 應(yīng)用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（ PLGA）和聚乙烯醇 (PVA )包載 ATRAP基因質(zhì)粒，制備納米級粒子混合物。 在大鼠離體 VSMC及大鼠頸血管損傷模型上，通過納米粒子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染的方法，以 VSMC凋亡、血管炎性因子的變化及對血管內(nèi)膜增生的影響為觀測指標(biāo)，評價(jià)納米粒子攜帶 ATRAP基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的效率及進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)染率的可行性。論證納米粒子介導(dǎo)的 ATRAP在 VSMC凋亡及血管內(nèi)膜增生抑制上的作用及其細(xì)胞分子機(jī)制。 制備包含在醫(yī)用蛋白膠或懸浮液內(nèi)的納米粒子介導(dǎo)的ATRAP基因制劑，使其可以直接在術(shù)中涂于受損血管外膜或通過腔內(nèi)介入的方法到達(dá)受損血管，以解決目前血管外科術(shù)后內(nèi)膜增生的世界性難題。 Thanks for Your Attention!
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