【正文】 ．準確稱取肝臟1克，置玻璃瓶．70C保存。測定時取出。70℃保存的肝臟，室溫；解凍：肝臟1克，剪碎：加3ml冰預冷勻漿液，置5ml玻璃勻漿器內勻漿；肝組織勻漿液置于低溫超速離心機內，4℃，12000rpm離心10min，取上清液測葡萄糖激酶活性。對于C和c組，C組以最適濃度的綠茶多糖、c組以等體積生理鹽水連續(xù)灌胃8周。8周末處死動物取胰腺，胰腺蘇木素一伊紅(HE)染色制成組織學切片進行形態(tài)學觀察，進一步分析該兩組胰島素產生量。社會的快速發(fā)展促使人們生活水平的不斷提高，糖尿病作為一種由此導致的“富貴病”已經(jīng)成為繼腫瘤、心血管疾病之后的第三大嚴重慢性非傳染性疾病。其中Ⅱ型糖尿病患者的激增是造成全世界糖尿病患者總數(shù)劇增的主要原因。對于Ⅱ型糖尿病德預防和治療，已經(jīng)成為當今社會的最熱點為題之一。茶作為人們生活的必需品之一，有著悠久的歷史和博大精深的文化。近年來國內外對茶葉的深入研究也表明，茶葉富含多種礦物質、氨基酸等營養(yǎng)成分以及茶多酚、茶色素等具有多種保健作用的功能因子，特別是對茶葉降糖作用的研究成果為糖尿病患者提供了一種簡便易行、便于長期堅持且十分經(jīng)濟的控制病程發(fā)展的方法。因此，以茶葉為主要成分或載體的降糖產品的開發(fā)也有著非常廣闊的前景。其中以茶多糖的降糖作用最為突出。綠茶作為一種世界流行飲料，已經(jīng)深入人們的生活，故綠茶多糖對糖尿病的預防和治療更具有研究價值。以往的研究表明，茶葉中除含有茶多酚、生物堿、揮發(fā)油等成分外，近年來還發(fā)現(xiàn)有另一種組分為茶多糖（TPS）。它們常與蛋白質結合在一起。茶葉中具有降血糖效果的成分是TPS，國內外對TPS的組分及降糖作用也有報道[14]。、影響糖尿病小鼠糖耐量和體重以及對糖尿病小鼠血糖、胰島素、血脂、果糖胺及肝糖原的多少都會有影響。但是茶多糖到底是怎樣在機體內作用，怎樣達到降低血糖的目的，到目前為止還沒有文章把這復雜的機制研究明白。并且關于綠茶多糖預防和治療糖尿病的研究更是微乎其微。因此我在借鑒前人實驗的基礎上，更加具體詳盡了實驗步驟，運用了更加精確的實驗儀器，進行全面的深入的分析，下面我分點介紹本設計的特點。倪德江等[15]研究多種茶多糖的傳統(tǒng)提取方法，可是得到的成分不夠純，茶多糖中會混有未脫掉的蛋白和其他成分，同時得到的茶多糖活性會受到影響。本設計采用層析的方法將粗提取的綠茶多糖進行純化，期望得到的綠茶多糖含量高并且具有較高的活性，使在作用于試驗用糖尿病小鼠是有較好的降血糖作用，有利于實驗數(shù)據(jù)的測量和機理的探究分析。 綠茶多糖灌胃前后小鼠空腹血糖水平變化本設計用最適濃度灌胃，有對照組和實驗組各8只小鼠，用GODPAP法測定小鼠的血糖，此實驗借鑒前人的方法，在儀器上和試劑使用上有有所優(yōu)化。王黎明等[16]研究時采用測定糖類物質在代謝途徑中量的改變，得出茶多糖影響糖代謝的結論。而本設計檢測糖尿病小鼠經(jīng)綠茶多糖灌胃后代謝途徑中各種酶的活性，目的是為了了解綠茶多糖是否是通過影響這些代謝相關酶的活性進而影響機體糖代謝。 綠茶多糖對糖尿病小鼠胰島素產量影響以往的研究實驗是通過直接測定代謝情況和胰島素產生水平。本設計究其根本，通過觀察綠茶多糖灌胃后小鼠胰腺β細胞的形態(tài)和數(shù)量的改變，進而推斷胰島素的產生水平。通過為期三周的課設，我有很多的收獲。這不僅僅局限在自己完成了這項任務，而是在這個艱難的過程中一步步走到最后的所見——所感——所悟。對于我，科研性質的專業(yè)論文可以說是可望而不可及的東西，雖然我的專業(yè)需要學生廣泛閱讀相關期刊文獻，但我由于自己的惰性和自以為無用的思想，一直未曾碰觸。所以在這次課設之初，關于課題選擇和有關文獻的查閱讓我有點應付不來。老師的指點也讓我少走了很多彎路：先查資料——確定大體知識范圍——整理內容——撰寫內容——根據(jù)內容——擬定題目，按照這個步驟我一步步摸索前行。通過閱讀大量關于糖尿病知識的文章，我認識到糖尿病已經(jīng)嚴重威脅到人類的生存，研究其致病機理和治療機制已經(jīng)成為當今社會的當務之急。因此我決定自己的研究課題從此著手。緊接著我又查閱了關于這一方面的研究進展和方向，發(fā)現(xiàn)綠茶多糖對糖尿病有治療作用，但其治療機理還尚未研究出來。我的設計《綠茶多糖對Ⅱ型糖尿病小鼠治療機制研究的設計》也正是以此為突破口，希望能有所成果。撰寫報告是課設主要的一塊，把自己的所得所思寫成報告書，我邊寫邊改，最后又是不計其數(shù)的修改更正。把這些東西落實成為思路順暢、切實可行的實驗指導真不是一件容易的事情，細心、耐心、信心、恒心一樣都不能少?？偠灾?，在這次課程設計中我學到的是一種態(tài)度：認真、細心、嚴謹，收獲的是一種思想：把想法整理成思路，把想法落實到行動，用理論指導行動。雖然困難重重，自己的設計也不盡完美，但是我仍然感謝，因為這只是我學業(yè)路上一個新的起點。我不怕每一次的困難，我只希望自己可以收獲克服困難的勇氣和智慧。參考文獻[1] 劉超, [J]. 安徽中醫(yī)學院學報, 1999, 18(5): 8385. [2] 易鳳英, 劉素純, [J]. 安徽農業(yè)科學, 2010, 38(6): 29112913. [3] 李雷, 汪東風, [J]. 茶葉科學, 2006, 26(2): 102107. [4] [J]. 生意通, 2007(6): 79. [5] 陳海霞, [J]. 營養(yǎng)學報. 2002, 24(1): 8586. [6] 傅博強, 謝明勇, 、組成及藥理作用研究進展[J]. 南昌大學學報(理科版), 2001, 25(4): 358364. [7] [J]. 瀘州醫(yī)學院學報, 2004, 27(3): 258259. [8] 芮莉莉. 蕭建中, [J]. 中日友好醫(yī)院學報. 2005, 19(2): 9396. [9] 吳建芬, 馮磊, [J]. 浙江預防醫(yī)學, 2003, 15(9): 1011, 13. [10] 徐梓輝, 周世文, 、SOD活性變化的影響[J]. 成都中醫(yī)藥大學學報, 2002, 25(1): 38. [11] 徐梓輝, 周世文, [J]. 中國糖尿病雜志, 2002, 10(1): 4448. [12] 徐梓輝, 周世文, 、T淋巴細胞亞群的影響[J]. 湖南中醫(yī)學院學報, 2001, 21(1): 1719. [13] 倪德江, 陳玉瓊, . 茶葉科學, 2003, 23(1): 1115. [14] 楊澤, [J]. 中國糖尿病雜志, 2003, 11(2): 78. [15] 倪德江, 陳玉瓊, [J]. 2004, 26(1): 5760. [16] 王黎明, [J]. 2010, 29(3): 354358. 21