【正文】 外，取各品種項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成10ml，必要時濾過，濾液照分光光度法于規(guī)定波長處測定，吸光度不得超過規(guī)定值。第三法（色差計法）本法是通過色差計直接測定溶液的透射三刺激值，對其顏色進行定量表述和分析的方法。當目視比色法較難判定供試品與標準比色液之間的差異時，應考慮采用本法進行測定與判斷。供試品與標準比色液之間的顏色差異，可以通過分別比較它們與水之間的色差值來得到，也可以通過直接比較它們之間的色差值來得到?，F(xiàn)代顏色視覺理論認為，在人眼視網膜上有三種感色的錐體細胞，分別對紅、綠、藍三種顏色敏感。顏色視覺過程可分為兩個階級，第一階段，視網膜上三種獨立的錐體感色物質，有選擇地吸收光譜不同波長的輻射，同時每一物質又可單獨產生白和黑的反應，即在強光作用下產生白的反應，無外界刺激時產生黑的反應；第二階段，在神經興奮由錐體感受器向視覺中樞的傳導過程中，這三種反應又重新組合，最后形成三對對立性的神經反應，即紅或綠、黃或藍、白或黑的反應。最終在大腦皮層的視覺中樞產生各種顏色感覺。自然界中的每種顏色都可以用選定的、能刺激人眼中二種受體細胞的紅、綠、藍三原色，按適當比例混合而成。由此引入一個新的概念—三刺激值，即在給定的三色系統(tǒng)中與待測色達到色匹配所需要的三個原刺激量，分別以X、Y、Z表示。通過對眾多具有正常色覺的人體（稱為標準觀察者，即標準眼）進行廣泛的顏色比較試驗，測定了每一種可見波長（400～760nm）的光引起每種錐體刺激的相對數(shù)量的色匹配函數(shù)，這些色匹配函數(shù)分別用、來表示。把這些色匹配函數(shù)組合起來，描繪成曲線，就叫做CIE色度標準觀察者的光譜三刺激值曲線（圖1）。圖1 CIE 1931色度標準觀察者的光譜三刺激值曲線（10176。視場）色匹配函數(shù)和三刺激值間的關系以下列方程表示：X=K∫S(λ)P(λ)x (λ)d (λ)Y=K∫S(λ)P(λ)y (λ)d (λ)Z=K∫S(λ)P(λ)z (λ)d (λ)式中 K為歸化系數(shù)； S（λ）為光源的相對光譜功率分布； P（λ）為物質色的光譜反射比或透射比； 、為標準觀察者的色匹配函數(shù)； d（λ）為波長間隔，一般采用10nm或5nm。當某種顏色的三刺激值確定之后，則可用其計算出該顏色在一個理想的三維顏色空間中的坐標，由此推導出許多組的顏色方程（稱為表色系統(tǒng)）來定義這一空間。如：CIE1931XYZ表色系統(tǒng)XIE1964補充標準色度系統(tǒng)，CIE1976L*a*b*色空間（CIELab均勻色空間），Hunter表色系統(tǒng)等。為便于理解和比對，入們通常采用CIELab均勻色空間來表示顏色及色差。該色空間由直角坐標L*a* b*構成。在三維色坐標系的任一點都代表一種顏色，其與參比點之間的幾何距離代表兩種顏色之間的色差（圖2和圖3）。相等的距離代表相同的色差值。用儀器法對供試品溶液與其規(guī)定的標準比色液的顏色進行比較時，需比較的參數(shù)就是空白對照液的顏色和供試溶液或其規(guī)定的標準比色液顏色在均勻色空間中的差值。在CIELab均勻色空間中，三維色坐標L*、a*、b*與三刺激值X，Y，Z和色差之間的關系如下：明度指數(shù)L*=116（Y/Yn）1/3－16色品指數(shù)a*=500〔（X/Xn）1／3－（Y/Yn）1／3〕色品指數(shù)b*=色差ΔE* =以上公式僅適用于X/Xn、Y/Yn、Z/Zn 856時。式中 X、Y、Z為待測溶液的三刺激值；Xn、Yn、Zn為完全漫反射體的三刺激值；ΔE*為供試品榕液與標準比色液的色差；ΔL*為供試品溶液與標準比色液的明度指數(shù)之差，其中ΔL*為正，表示供試品溶液比標準比色液顏色亮（鮮艷）；Δa*、Δb*為供試品溶液色與標準比色液色的色品指數(shù)之差，其中Δa*、Δb*為正，表示供試品比標準比色液顏色更深〔飽和〕。色差計的工作原理簡單地說即是模擬入眼的視覺系統(tǒng)，利用儀器內部的模擬積分光學系統(tǒng)，把光譜光度數(shù)據的三刺激值進行積分而得到顏色的數(shù)學表達式，從而計算出L*、a*、b*值及對比色的色差。圖4為色差計光學系統(tǒng)示意圖。在儀器使用的標準光源與日常觀察供試品所使用光源光譜功率分布一致（比如晝光），其光電響應接收條件與標準觀察者的色覺特性一致（比如10176。視場）的條件下，用儀器方法測定顏色，不但能夠精確、定量地測定顏色和色差，而且比目測法更為科學客觀，且不隨時間、地點、入員變化而發(fā)組變化。使用的測色儀器一般為光電積分型色差計，照明觀察條件為od條件或d∕o條件，D65光源照明，10176。視場，可直接測出三刺徽值X、Y、Z，并能直接計算給出L*、a*、b*和ΔE*及供試品溶液的色調色號。因溶液的顏色隨著被測定溶液的液層厚度而變，所以除另有規(guī)定外，測量透射色時，應使用1cm厚度液槽。為保證測量的可靠性，應定期對儀器進行全面的檢定。在每次測量時，要用無彩色物質如水或空氣對儀器進行校準。室溫時，在D65為光源、10176。視場條件下，水或空氣的三刺激值分別為：X＝；Y＝；Z=2．測定法除另有規(guī)定外，用水對儀器進行校準，取按各品種項下規(guī)定的方法分別制得的供試品溶液和標難比色液，置儀器上進行測定，供試品溶液與水的色差值ΔE*應不超過相應色調的標準比色液與水的色差值ΔE*。如品種項下規(guī)定的色調有兩種，且供試品溶液的實際色調介于兩種規(guī)定色調之間，且難以判斷更傾向何種色調時，將測得的供試品溶液與水的色差值（ΔE*）與兩種色調標準比色液與水的色差值的平均值〔ΔE*≤〕比較，不得更深。附錄Ⅺ B 粒度測定法本法用于測定制劑的粒子大小或限度。第一法（顯微鏡法）本法中的粒度，系以顯微鏡下觀察到的長度表示。目鏡測微尺的標定 照顯微鑒別祛（附錄Ⅱ C）標定。測定法 除另有規(guī)定外，取供試品，用力搖勻〔黏度較大者可按品種項下的規(guī)定加適量甘油溶液（1→2）稀釋〕，照該劑型或品種項下的規(guī)定取供試品，置載玻片上，覆以蓋玻片（注意防止氣泡混入），輕壓使顆粒分布均勻；半固體可直接涂于載玻片上。立即在50～100倍顯微鏡下檢視蓋玻片全部視野，應無凝聚現(xiàn)象，并不得檢出該劑型或品種項下規(guī)定的50μm及50μm以上的粒子。再在200～500倍顯微鏡下檢視該劑型或品種項下規(guī)定的視野內的總粒數(shù)及規(guī)定大小的粒數(shù)，計算所占百分比。第二法（篩分法） 除另有規(guī)定外，取供試品10g，稱定重量，置規(guī)定的藥篩中，篩上加蓋，并在篩下配有密合的接收容器，按水平方向旋轉振搖至少3分鐘，并不時在垂直方向輕叩篩。取篩下的顆粒及粉末，稱定重量，計算所占百分比。 除另有規(guī)定外，取供試品30g，稱定重量，置規(guī)定的藥篩中，保持水平狀態(tài)過篩，左右往返，邊篩動邊輕叩3分鐘。取不能通過小號篩和能通過大號篩的顆粒及粉末，稱定重量，計算所占百分比。附錄Ⅺ C 可見異物檢查法可見異物是指存在于注射劑、眼用液體制劑中，在規(guī)定條件下目視可以觀測到的不溶性物質，其粒徑或長度通常大于50μm。注射劑、眼用液體制劑應在符合藥品生產質量管理規(guī)范（GMP）的條件下生產，產品在出廠前應采用適宜的方法逐一檢查并同時剔除不合格產品。臨用前，也在自然光下目視檢查（避免陽光直射），如有可見異物，不得使用?？梢姰愇餀z查法有燈檢法和光散射法。一般常用燈檢法，也可采用光散射法。燈檢法不適用的品種，如用深色透明容器包裝或液體色澤較深（一般深于各標準比色液7號）的品種可選用光散射法。實驗室檢測時應避免引入可見異物。當制備注射用無菌粉末和無菌原料藥供試品溶液時，或供試品溶液的容器不適于檢測（如不透明、不規(guī)則形狀容器等），需轉移至適宜容器中時，均應在100級的潔凈環(huán)境（如層流凈化臺）中進行。用于本試驗的供試品，必須按規(guī)定隨機抽樣。第一法（燈檢法）燈檢法應在暗室中進行。檢查裝置 如下圖所示。（光照度可在1000～4000lx范圍內調節(jié)）；；（供檢查有色異物）；（指遮光板內側）。檢查人員條件 遠距離和近距離視力測驗，（）；應無色盲。檢查法溶液型、乳狀液及混懸型制劑 除另有規(guī)定外，取供試品20支（瓶），除去容器標簽，擦凈容器外壁，必要時將藥液轉移至潔凈透明的適宜容器內；置供試品于遮光板邊緣處，在明視距離（指供試品至人眼的清晰觀測距離，通常為25cm），分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部輕輕旋轉和翻轉容器使藥液中可能存在的可見異物懸?。ǖ珣苊猱a生氣泡），輕輕翻搖后即用目檢視，重復3次，總時限為20秒。供試品裝量每支（瓶）在10ml及10ml以下的，每次檢查可手持2支（瓶）。注射用無菌粉末 除另有規(guī)定外，取供試品5支（瓶），用適宜的溶劑及適當?shù)姆椒ㄊ顾幏廴咳芙夂?，按上述方法檢查。配帶有專用溶劑的注射用無菌粉末，應先將專用溶劑按溶液型制劑檢查合格后，再用以溶解注射用無菌粉末。無菌原料藥 除另有規(guī)定外，按抽樣要求稱取各品種制劑項下的最大規(guī)格量5份，分別置潔凈透明的適宜容器內，用適宜的溶劑及適當?shù)姆椒ㄊ顾幬锶咳芙夂?，按上述方法檢查。注射用無菌粉末及無菌原料藥所選用的適宜溶劑應無可見異物。如為水溶性藥物，一般使用不溶性微粒檢查用水（參見附錄Ⅸ R不溶性微粒檢查法）進行溶解制備；如為其他溶劑，則應在各品種項下中作出規(guī)定。溶劑量應確保藥物溶解完全并便于觀察。注射用無菌粉末及無菌原料藥溶解所用的適當方法應與其制劑使用說明書中注明的臨床使用前處理的方式相同。如除振搖外還需其他輔助條件，則應在各品種項下中作出規(guī)定。用無色透明容器包裝的無色供試品溶液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應為1000～1500lx；用透明塑料容器包裝或用棕色透明容器包裝的供試品溶液或有色供試品溶液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應為2000～3000lx；混懸型供試品或乳狀液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應增加至約4000lx。結果判定各類注射劑、眼用液體制劑 在靜置一定時間后輕輕旋轉時均不得檢出煙霧狀微粒柱，且不得檢出金屬屑、玻璃屑、長度或最大粒徑超過2mrn的纖維和塊狀物等明顯可見異物。微細可見異物（如點狀物、2mm以下的短纖維和塊狀物等）如有檢出，除另有規(guī)定外，應分別符合下列規(guī)定：溶液型靜脈用注射液、注射用濃溶液 20支（瓶）檢查的供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物的供試品僅有1支（瓶），應另取20支（瓶）同法復試，均不得檢出。溶液型非靜脈用注射液 被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，應另取20支（瓶）同法復試，初、復試的供試品中，檢出微細可見異物的供試品不得超過2支（瓶）。溶液型滴眼劑 被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，應另取20支（瓶）同法復試，初、復試的供試品中，檢出微細可見異物的供試品不得超過3支（瓶）。混懸型、乳狀液型注射液及滴眼劑 被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出金屬屑、玻璃屑、色塊、纖維等明顯可見異物。臨用前配制的溶液型和混懸型滴眼劑，除另有規(guī)定外，應符合相應的可見異物規(guī)定。注射用無菌粉末 被檢查的5支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，每支（瓶）供試品中檢出微細可見異物的數(shù)量應符合下表的規(guī)定；如有1支（瓶）不符合規(guī)定，另取10支（瓶）同法復試，均應符合規(guī)定。類別可見異物限度化學藥≤4個生化藥、抗生素藥和中藥≥2g≤10個＜2g≤8個配帶有專用溶劑的注射用無菌粉末，專用溶劑應符合相應的溶液型注射液的規(guī)定。無菌原料藥 5份檢查的供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，每份供試品中檢出微細可見異物的數(shù)量應符合下表的規(guī)定；如有1份不符合規(guī)定，另取10份同法復試，均應符合規(guī)定。類別可見異物限度化學藥≤2個生化藥、抗生素藥和中藥≤5個既可靜脈用也可非靜脈用的注射劑應執(zhí)行靜脈用注射劑的標準。第二法（光散射法）當一束單色激光照射溶液時，溶液中存在的不溶性物質使入射光發(fā)生散射，散射的能量與不溶性物質的大小有關。本方法通過對溶液中不溶性物質引起的光散射能量的測量，并與規(guī)定的閾值比較，以檢查可見異物。不溶性物質的光散射能量可通過被采集的圖像進行分析。設不溶性物質的光散射能量為E，經過光電信號轉換，即可用攝像機采集到一個錐體高度為H，直徑為D的相應立體圖像。散射能量E為D和H的一個單調函數(shù)，即E= f（D， H）。同時，假設不溶性物質的光散射強度為q，攝像曝光時間為T，則又有E=g（q，T）。由此可以得出圖像中的D與q、T之間的關系為D=w（q，T），也為一個單調函數(shù)關系。在測定圖像中的D值后，即可根據函數(shù)曲線計算出不溶性物質的光散射能量。儀器裝置和檢測原理 儀器由旋瓶裝置、激光光源、圖像采集器、數(shù)據處理系統(tǒng)和終端顯示系統(tǒng)組成，并配有自動上瓶和下瓶裝置。供試品通過上瓶裝置被送至旋瓶裝置，旋瓶裝置應能使供試品沿垂直中軸線高速旋轉一定時間后迅速停止，同時激光光源發(fā)出的均勻激光束照射在供試品上；當藥液渦流基本消失，瓶內藥液因慣性繼續(xù)旋轉，圖像采集器在特定角度對旋轉藥液中懸浮的不溶性物質引起的散射光能量進行連續(xù)攝像，采集圖像不少于75幅；數(shù)據處理系統(tǒng)對采集的序列圖像進行處理，然后根據預先設定的閾值自動判定超過一定大小的不溶性物質的有無，或在終端顯示器上顯示圖像供人工判定，同時記錄檢測結果，指令下瓶裝置自動分檢合格與不合格供試品。儀器校準 儀器應具備自動校準功能，在檢測供試品前須采用標準粒子進行校準。除另有規(guī)定外，分別用粒徑為40μm和60μm的標準粒子對儀器進行標定。根據標定結果得到曲線方程并計算出與粒徑50μm根對應的檢測像素值。當把檢測像素參數(shù)設定為與粒徑50μm相對應的數(shù)值時，對60μm的標準粒子溶液測定3次，應均能檢出。檢查法溶液型注射液 除另有規(guī)定外，取供試品20支（瓶），除去不透明標簽，擦凈容器外壁，置儀器上瓶裝置上，根據儀器的使用說明書選擇適宜的測定參數(shù)，啟動儀器，將供試品檢測3次并記錄檢測結果。凡儀器判定有1次不合格者，須用燈檢法作進一步確認。用深色透明容器包裝或液體色澤較深等燈檢法檢查困難的品種不用燈檢法確