發(fā)酵豆粕濕料資料生產(chǎn)工藝及相關(guān)指標-資料下載頁
2025-06-16 07:33本頁面
【正文】 后的稀釋度 涂布：取最后稀釋度樣品開始涂布，樣品重新震蕩1min（準確計時）（帶槍頭）插入試管底部，在火焰保護下將槍頭尖部靠于打開的培養(yǎng)基上打出菌液，取涂布器均勻涂布30秒左右，至樣品完全滲透入培養(yǎng)基（涂布過程中培養(yǎng)基有澀感），連續(xù)做3個平行。 同樣操作共做3個連續(xù)的稀釋度（稀釋度由高到低），不同稀釋度更換槍頭和涂布器 涂布完的培養(yǎng)皿做好標示（樣品名稱、稀釋度、操作人）3 樣品培養(yǎng) 將上述培養(yǎng)皿用報紙包好（減少水分蒸發(fā)，并防止污染），倒置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h可以計數(shù)（不同芽孢桿菌樣品所需的培養(yǎng)溫度和時間會有差異）。4 菌落計數(shù) 通過菌落識別結(jié)合鏡檢，確定有效菌。~300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標準，統(tǒng)計有效活菌數(shù)目。當只有一個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)在20~300之間時，則以該菌落數(shù)計算。若有兩個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)均在20~300之間時，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值（稀釋度大的菌落總數(shù)10與稀釋度小的菌落總數(shù)之比）決定，若其比值小于等于2應(yīng)計算兩者的平均數(shù)；若大于2則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計算。準確計數(shù)有效菌落數(shù)和雜菌總數(shù)，每個稀釋度3個培養(yǎng)皿菌落數(shù)之和的平均數(shù)為該稀釋度有效菌落總數(shù) 計算 有效菌數(shù)（億/ml,克）=有效菌落總數(shù)10稀釋倍數(shù) 酵母活菌總數(shù)的檢測1 儀器、設(shè)備、試劑和培養(yǎng)基 溫箱：30177。1℃?！〕瑑艄ぷ髋_ 分析天平。 滅菌吸管：1ml（）、10ml（）。 濕熱滅菌鍋?！缇矫螅褐睆綖?0mm?！?的無菌生理鹽水。 震蕩器YPD培養(yǎng)基：蛋白胨2%，酵母膏1%，葡萄糖2%，‰，%，116℃，20min蒸汽滅菌后備用。孟加拉紅培養(yǎng)基，成品，121℃，15min滅菌備用。YPD培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基任選其一均可。在超凈工作臺上將滅好菌的培養(yǎng)基倒平皿，每個大約20ml，放在紫外燈下吹風(fēng)1小時，然后放在工作臺面過夜，第二天備用（倒好的平板一次用不完的，可放入冰箱冷藏，保藏時間不得超過一周）。2 操作步驟 ，注入盛有99ml生理鹽水的帶有玻璃珠的三角瓶中，30℃充分振蕩30min。 吸取1：100的稀釋液1ml注入盛有9ml無菌生理鹽水的試管中，混勻成1：1000的稀釋液，按同法依次10倍遞增稀釋成1：10000、1：100000稀釋液等備用，吸取不同濃度的稀釋液時必須更換吸管。 根據(jù)待檢樣中酵母情況的估計，選擇2～3個適宜稀釋液，分別在作10倍遞增稀釋的同時，用涂布棒均勻涂布。每個稀釋度做三個平皿。 涂布好后，靜置半小時，翻轉(zhuǎn)平皿，置30℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)約48小時后取出，計算平板內(nèi)菌落數(shù)目，乘以10再乘以稀釋倍數(shù)，即為每克樣品中的酵母活菌的總數(shù)。19
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