氯霉素類藥物在獸醫(yī)臨床上應用及其殘留研究進展-資料下載頁
2025-05-26 12:12本頁面
【正文】 M 是將處理后的樣品注入牛津杯，與含菌液的檢測平板貼合，培養(yǎng)后根據(jù) 抑菌圈直徑的大小 來判定結果， CPM 的檢出限為 ～ 2mg／ kg，比 STOP靈敏度高，并可在樣品的處理中加入其他抗生素以 消除干擾影響 。微生物學法簡便，費用低， 但敏感性和專一性低，易漏檢 ，也會出現(xiàn) 假陽性 ，引起誤判，但對于高殘留樣品進行殘留篩選仍不失為一種好的方法。 免疫分析法 ?氯霉素免疫測定法包括 放射免疫測定法（ RIA）、 酶聯(lián)免疫吸附測定法 （ ELISA) 。 RIA 的基本原理是用 同位素 標記藥物樣品，和非標記待測藥物與 CAP抗體結合競爭，樣品中的被測物含量與測定的放射性活度成反比，常用的標記物是 同位素 H、 C、 I等， RIA的優(yōu)點在于 靈敏、特異、簡便， 但 標記物易衰變 ，影響了其準確性。 ? ELISA是基于抗原和抗體反應而建立的。由于氯霉素是半抗原，不能刺激機體產(chǎn)生抗體。要使半抗原性物質具有免疫原性，就需使其與大分子載體物質（蛋白質）相結合制備人工抗原，而后將其作為抗原進行使用，動物體內即可產(chǎn)生相應特異性的抗氯霉素的抗體。在此基礎上建立酶聯(lián)免疫競爭法測定氯霉素含量。 ELISA避免了 RIA存在的 穩(wěn)定性問題 ，更加簡便、靈敏，檢測限達到 pg級，且 同時可檢測多數(shù)樣品 ，是十分理想的快速篩選手段， 缺點在于出現(xiàn)假陽性的概率較大 ，易引起誤判。 ?因 ELISA 具有 快速、靈敏度高、專一性強 的優(yōu)勢，在肉制品、水產(chǎn)品與環(huán)境中應用相當廣泛。目前國內、外研制的 氯霉素 ELISA 檢測試劑盒 ，廣泛用于氯霉素的檢測。如Randox公司提供的氯霉素檢測試劑盒對組織中氯霉素的檢測限可達 ，尿液中氯霉素的檢測限可達 ，回收率為84% 以下，且與四環(huán)素、慶大霉素，氨芐青霉素無交叉反應，檢測時間不到 小時 定量測定法 ?目前國際公認的氯霉素的定量測定方法是氣相色譜法 (GC)和高效液相色譜法（ High Performance Liquid Chromatography,HPLC) 氣相色譜法 ? GC是 1974年在美國官方分析化學家協(xié)會（ AOAC）年會上提出的，原理是氯霉素均含有電子親和性強的化學基團，可用電子俘獲檢測器進行測定。 GC 是定量測定氯霉素殘留較為經(jīng)典成熟的方法，專一性強，靈敏可靠，檢測限低（ 小于 1ug/kg),但由于受到氯霉素揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 ,需要衍生化程序 ,比較 繁瑣 ,一定程度上限制了 GC 的應用。 高效液相色譜法 ?原理：氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素都有很強的 紫外吸收 ，因此可直接用 HPLC/UVD 測定。 ?樣品制備不 需要衍生化過程 ，操作簡單，但UVD選擇性較差，具有紫外吸收的雜質都會產(chǎn)生干擾 ，因此 HPLC／ UVD的檢測限比 GC高，一般在 5ug／ kg，樣品前處理必須排除具有紫外吸收的內源性雜質的干擾 。 確證法 ?氣 — 質聯(lián)用法 GC／ MS用于動物性食品中 CAP的殘留確證已是較為成熟的方法，其原理是 CAPs硅烷化后都有幾個豐度較大的 電子轟擊碎片離子 ，便于進行定性鑒別，靈敏度高，在 ng級以下。氣相色譜／選擇性離子監(jiān)測／質譜性 (GC／SIM／ NS)分析 CAP殘留，靈敏度更高，可達到 pg ?液 — 質聯(lián)用法 LC／ MS是一種新的確證方法，不需要衍生化處理，操作簡便，靈敏度高。 LC／ SIM／MS的分析方法，回收率高，檢測限低，達到2ng／ g以下，有很強的檢測和確證能力，目前作為理想的殘留確證方法已進入實際應用階。 酶免疫測定法 非常適合對氯霉素殘留篩選的需要，它能在短短的幾個小時檢測幾十到上百個試樣，也不需要復雜的儀器設備，并有 特異性強、靈敏度高、試樣預處理簡單 等優(yōu)點，它在 現(xiàn)場監(jiān)控和基層 實際檢測上有著廣闊的應用前景。 而高效液相色譜法和氣相色譜法具有 精確可靠、靈敏度高、重復性好以及假陽性少 等優(yōu)點，只要選擇出簡單的前處理條件和色譜條件。在氯霉素殘留確認工作中， GC/MS 和LC/MS/MS 是首選的方法。 食品中氯霉素殘留的檢測方法，今后仍采取 ELISA試劑盒對樣品進行初篩，對陽性或樣品用 GC/MS 或 LC/MS 進行確證。一般來講， LC/MS 技術確證氯霉素比 G C / M S 技術確證迅速，但由于 GC/MS 技術的靈敏度高 ，可利用的碎片離子多，所以目前確證牛奶中氯霉素類殘留主要用 G C /M S 技術。
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