實(shí)驗(yàn)七聚丙烯酰胺凝膠柱狀電泳分離血清蛋白-資料下載頁
2025-05-26 07:01本頁面
【正文】 用微量取樣器吸取樣品 ，讓針頭穿過膠面上的緩沖液 ， 緩慢推動(dòng)取樣器 ， 使樣品慢慢落在膠面上 。 推動(dòng)取樣器時(shí)不宜過猛 ， 以免樣品和緩沖液混合 。 3．電泳 將已加好樣品的凝膠管，輕輕除去下端的皮塞或封閉物，將管插入圓盤電泳槽孔中，管要插得垂直。插好后加入少量電極緩沖液于槽中，檢查是否漏水。如不漏水即可加足電極緩沖液，至少要淹沒過凝膠管頂部。電泳槽下槽中也加入電極緩沖液，至少要淹沒電極。然后接通電源，負(fù)極在上，正極在下。電泳初期電壓控制在 80V，待樣品進(jìn)入分離膠后，加大電壓到 160V，繼續(xù)電泳。當(dāng)指示劑到達(dá)距管底 1cm處時(shí)停止電泳，關(guān)閉電源。 剝膠 倒出電極緩沖液，取出凝膠玻璃管。用帶長(zhǎng)注射針頭（ 10cm）的注射器吸滿水，針頭插入玻璃管壁與凝膠之間，邊插入邊推水，并使針頭沿管壁轉(zhuǎn)動(dòng)，直到針頭插到頭。這樣凝膠柱即可脫離玻璃管滑出。若仍不自動(dòng)滑出，可用洗耳球輕輕把凝膠柱吹出。但不能用力過大，以免凝膠滑出過猛而斷裂。 5．染色 將取出的凝膠柱放入大試管或平皿中，加入染色液，染色 20～ 30min。倒處染色液并回收，換成脫色液漂洗，多次更換脫色液或放在 37℃處加熱促進(jìn)脫色，直至無蛋白區(qū)帶處背景的顏色腿凈，可見清晰的血清蛋白質(zhì)電泳圖譜為止。 電泳結(jié)果可用掃描儀掃描記錄或拍照。凝膠柱在 7%的醋酸溶液中可長(zhǎng)期保存。
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