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基因工程制藥碎片網(wǎng)載基因工程制藥-資料下載頁

2025-05-26 06:02本頁面
  

【正文】 A克隆的分離和鑒定 二、化學合成法 較小的蛋白質(zhì)或多肽的編碼基因可以用化學合成法合成。 必須知道目的基因的核苷酸順序或目的蛋白質(zhì)的氨基酸順序。 用化學法合成目的基因 DNA不同部位的兩條鏈的寡核苷酸短片段,再退火成為兩端形成粘性末端的DNA雙鏈片段,然后將這些雙鏈片段按正確的次序進行退火使連接成較長的 DNA片段,再用連接酶連接成完整的基因。 人工化學合成基因的限制有: ⒈不能合成太長的基因。目前 DNA 合成儀所合成的寡核苷酸片段僅為 50~ 60 bp,因此 只適用于克隆小分子肽的基因。 ⒉ 遺傳密碼的簡并使選擇密碼子困難,用氨基酸順序推測核苷酸序列,得到的結(jié)果可能與天然基因不完全一致,易造成中性突變。 ⒊費用高。
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