第二章基因工程制藥新版3-資料下載頁
2024-11-19 22:08本頁面
【正文】 GGCTTAAGC,5180。 3180。,Eco RⅠ,定義,在目的基因兩端分別接上不同的 linker，然后將其與載體同時用二種不同的限制酶進(jìn)行切割，再將切割產(chǎn)物進(jìn)行連接的方法。稱為雙接頭法。 linker用化學(xué)方法合成的、具有某些限制酶專一識別位點(diǎn)的、由812個脫氧核苷酸殘基組成的單鏈。 linker的特性其自身就可以形成互補(bǔ)雙鏈。,優(yōu)缺點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)適用于所有外源性DNA片段的定向克隆 缺點(diǎn)： （1）載體會產(chǎn)生自身線性聚合。 （2）外源性目的基因會產(chǎn)生自身線性聚合。,（六）、平接法,定義 優(yōu)缺點(diǎn),定義,具有3羥基、和5磷?；钠烬R末端的DNA之間，在T4DNA連接酶的作用下，通過形成共價鍵結(jié)合，稱為平接法。,適用于：限制性內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的平端 粘端補(bǔ)齊或切平形成的平端,目的基因,限制性內(nèi)切酶,限制性內(nèi)切酶,T4 DNA連接酶 15186。C,重組體,優(yōu)缺點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)： （1）本方法是DNA重組中最簡單的一種方法。 （2）任何一種平齊末端的外源性DNA片段、和載體之間均可以進(jìn)行平接法重組。 缺點(diǎn)：（1）存在DNA片段的自身環(huán)化現(xiàn)象、和DNA線性化現(xiàn)象。 （2）反應(yīng)速度較慢。只有粘接法的1%。,基因重組和基因工程（課堂練習(xí)） 基因工程中常用的限制性內(nèi)切酶是 A. Ⅰ型限制酶 B. Ⅱ型限制酶 Ⅲ型限制酶 D. 核酸內(nèi)切酶 核酸外切酶 催化DNA缺口平移反應(yīng)的酶是 末端轉(zhuǎn)移酶 B. DNA聚合酶Ⅲ DNA聚合酶Ⅱ D. DNA聚合酶Ⅰ Taq DNA聚合酶,Klenow片斷具有下列酶活性 A. 5180?！?180。外切酶和 5180?！?180。聚合酶活性 5180?！?180。 和3180?！?180。外切酶活性 C. 5180?！?180。聚合酶 和3180?！?180。外切酶活性 5180。→3180。 和3180?！?180。聚合酶活性 E. 5180?！?180。 外切酶和3180?！?180。聚合酶活性 堿性磷酸酶的作用是 A. 使核酸片段3180。端加上磷酸基 B. 去除核酸片段的3180。端磷酸基 去除核酸片段的5180。端磷酸基 D. 使核酸片段的5180。端加上磷酸基 E. 使核酸鏈水解斷裂,下列是關(guān)于基因克隆常用載體的敘述，正確的是 在連接酶作用下，載體可與目的DNA連接構(gòu)成重組體 載體是將目的DNA引入宿主細(xì)胞的運(yùn)載蛋白 載體是將目的DNA引入宿主細(xì)胞的DNA分子 常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體和病毒等 載體可將目的DNA運(yùn)載入宿主細(xì)胞內(nèi)而本身不進(jìn)入細(xì)胞 DNA重組應(yīng)包括下列過程 分離并獲得目的基因和載體 B. 連接目的基因和載體構(gòu)成重組體 將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi) 從轉(zhuǎn)化菌落中篩選并鑒定含陽性重組體的菌落 E. 以上都包括,,目的DNA可來自 直接從組織中提取 B. 基因文庫 cDNA文庫 D. PCR擴(kuò)增 E. DNA合成儀合成 目的DNA與載體的連接方法可有 粘性末端連接 B. 平頭末端連接 同源多聚尾連接 D. 人工接頭法 E. 載體分子的自身環(huán)化連接,,,生活中的辛苦阻撓不了我對生活的熱愛。24.11.1724.11.17Sunday, November 17, 2024 人生得意須盡歡，莫使金樽空對月。09:22:4509:22:4509:2211/17/2024 9:22:45 AM 做一枚螺絲釘，那里需要那里上。24.11.1709:22:4509:22Nov2417Nov24 日復(fù)一日的努力只為成就美好的明天。09:22:4509:22:4509:22Sunday, November 17, 2024 安全放在第一位，防微杜漸。24.11.1724.11.1709:22:4509:22:45November 17, 2024 加強(qiáng)自身建設(shè)，增強(qiáng)個人的休養(yǎng)。2024年11月17日上午9時22分24.11.1724.11.17 精益求精，追求卓越，因為相信而偉大。2024年11月17日星期日上午9時22分45秒09:22:4524.11.17 讓自己更加強(qiáng)大，更加專業(yè)，這才能讓自己更好。2024年11月上午9時22分24.11.1709:22November 17, 2024 這些年的努力就為了得到相應(yīng)的回報。2024年11月17日星期日9時22分45秒09:22:4517 November 2024 科學(xué)，你是國力的靈魂；同時又是社會發(fā)展的標(biāo)志。上午9時22分45秒上午9時22分09:22:4524.11.17 每天都是美好的一天，新的一天開啟。24.11.1724.11.1709:2209:22:4509:22:45Nov24 相信命運(yùn)，讓自己成長，慢慢的長大。2024年11月17日星期日9時22分45秒Sunday, November 17, 2024 愛情，親情，友情，讓人無法割舍。24.11.172024年11月17日星期日9時22分45秒24.11.17,謝謝大家！
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