【正文】 染物去除，達(dá)到透水量恢復(fù)，延長(zhǎng)膜壽命的目的。在清洗程序設(shè)計(jì)中，通常要考慮下面兩個(gè)因素：（1）膜的化學(xué)特性，膜的化學(xué)特性是指耐酸、堿性、耐溫性、耐氧化性和耐化學(xué)試劑特性，它們對(duì)選擇化學(xué)清洗劑類(lèi)型、濃度、各生產(chǎn)廠家對(duì)其產(chǎn)品化學(xué)特性均給出簡(jiǎn)單說(shuō)明，當(dāng)要使用超出說(shuō)明書(shū)的化學(xué)清洗劑時(shí)，一定要慎重，先做小實(shí)驗(yàn)檢測(cè)是否可能給膜帶來(lái)危害。（2）污染物特性，這里主要是指它在不同介質(zhì)中，不同溫度下的溶解性、荷電性和它可氧化性及可酶解性等。這樣可有的放矢地選擇合適化學(xué)清洗劑，達(dá)到最佳清洗效果。1包涵體復(fù)性的主要方法稀釋法透析法超濾法層析法? 稀釋法：– 優(yōu)點(diǎn)直接加入水或緩沖液，簡(jiǎn)便 – 缺點(diǎn)是體積增加較大，變性劑稀釋速度太快，不易控制。– 目前稀釋法主要有一次稀釋、分段稀釋和連續(xù)稀釋三種方式。? 透析法：– 好處是不增加體積，通過(guò)逐漸降低外透液濃度來(lái)控制變性劑去除速度，– 易形成無(wú)活性蛋白質(zhì)聚體，且不適合大規(guī)模操作，無(wú)法應(yīng)用到生產(chǎn)規(guī)模。? 超濾法：– 在生產(chǎn)中較多的使用，規(guī)模較大，易于對(duì)透析速度進(jìn)行控制，– 缺點(diǎn)是有些蛋白可能在超濾過(guò)程中不可逆的變性。? 層析法：– 蛋白質(zhì)在變性劑存在下，利用其在填料上的反復(fù)分配作用，逐步使其構(gòu)象由U轉(zhuǎn)化為N狀態(tài)。– 優(yōu)勢(shì)在于：? 在進(jìn)樣后可很快脫除變性劑，操作效率高；? 層析固定相對(duì)變性蛋白的吸附可減少變性蛋白在脫除變性劑后形成聚集體，這不僅提高了蛋白質(zhì)復(fù)性的活性收率．而且可提高蛋白質(zhì)復(fù)性的初始濃度；? 在復(fù)性的同時(shí)可使目標(biāo)蛋白與雜質(zhì)分離，特別適合包涵體蛋白的復(fù)性；? 便于回收變性劑，以降低廢水處理成本；? 回收率高（高達(dá)90%以上）、快速、易放大，樣品稀釋倍數(shù)小（一般五倍左右）。 – 用于蛋白質(zhì)復(fù)性的層析折疊復(fù)性法主要有凝膠過(guò)濾(GC)，疏水層折 （HIC）、離子交換層析（IEC）和親和層析法（AC，含金屬鰲合色譜）– 主要的問(wèn)題就是復(fù)性過(guò)程中（可能在進(jìn)樣過(guò)程中，或在樣品溶液與流動(dòng)相混合但蛋白未和固定相接觸之前）會(huì)產(chǎn)生蛋白質(zhì)聚集體或沉淀 1影響包涵體復(fù)性的主要因素? 蛋白質(zhì)本身的性質(zhì) – 二硫鍵的數(shù)量，氨基酸的種類(lèi)，蛋白質(zhì)的復(fù)性效率在20%左右? 蛋白質(zhì)的復(fù)性濃度 – ? pH和溫度 – – 溫度影響反應(yīng)速度，過(guò)高影響蛋白質(zhì)穩(wěn)定性? 其他– 變性劑的起始濃度和去除速度、– 氧化還原電勢(shì)和離子強(qiáng)度– 共溶劑和其他添加劑的存在與否四、生物檢測(cè)部分 作為一個(gè)藥用重組蛋白需要檢測(cè)的理化性質(zhì)有那些？分子量、純度、等電點(diǎn)、特異性鑒別、紫外光譜掃描、肽圖分析、氨基酸組分分析、N－末端氨基酸序列、C－末端氨基酸序列分析、二硫鍵的分析 測(cè)定未知蛋白質(zhì)相對(duì)分子量的方法。l 還原型SDS－PAGE電泳l 分子篩（HPLC）l 質(zhì)譜 檢測(cè)蛋白質(zhì)純度指標(biāo)的方法。l 方法 分析機(jī)制l 反相HPLC 疏水性l 疏水性相互作用HPLC 疏水性l 毛細(xì)管電泳 荷質(zhì)比l 離子交換HPLC 電荷l 等電聚焦 電荷l 聚丙烯酰胺凝膠電泳 電荷、分子大小l SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子大小l 分子排阻HPLC 分子大小l 質(zhì)譜測(cè)量法 分子大小 蛋白質(zhì)的紫外特征吸收峰長(zhǎng)多少？引起的原因l 利用蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸中苯環(huán)的共軛雙鍵具有紫外吸收功能。l 檢測(cè)波長(zhǎng)280nm特異性鑒別利用蛋白質(zhì)的哪一性質(zhì)？根據(jù)抗原抗體特異性反應(yīng)？給藥系統(tǒng)：靶向制劑（包括靶向修飾）、脈沖給藥系統(tǒng)、擇時(shí)給藥系統(tǒng)、自調(diào)式釋藥系統(tǒng)、經(jīng)皮給藥系統(tǒng)、生物技術(shù)制劑、粘膜給藥系統(tǒng)常用的有片劑、丸劑、散劑、注射劑、酊劑、溶液劑、浸膏劑、軟膏劑等。？?jī)?yōu)點(diǎn)：蛋白質(zhì)或多肽類(lèi)藥物大多為內(nèi)源性物質(zhì)，臨床使用劑量小，藥理活性高，副作用小，很少有過(guò)敏反應(yīng)缺點(diǎn)：多數(shù)受胃酸及消化酶的降解破壞 其生物半衰期亦較短，需頻繁注射給藥 即使皮下或肌肉注射，其生物利用度也較低 長(zhǎng)期注射易造成患者心理和生理的痛苦 另外，多數(shù)多肽和蛋白質(zhì)類(lèi)藥物不易被親脂性膜所攝取，很難通過(guò)生物屏障。？①溫度的影響②pH對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象的影響③有機(jī)溶劑的影響④鹽的影響⑤ 表面活性劑對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象的影響？ 1. 有利于制劑形態(tài)的形成 2. 使制備過(guò)程順利進(jìn)行 3. 提高藥物的穩(wěn)定性 4. 調(diào)節(jié)有效成分的作用或改善生理要求，劑型對(duì)藥物的作用有何影響？（這一部分PPT沒(méi)有集中答案，網(wǎng)上找的）蛋白質(zhì)藥物劑型主要有：①現(xiàn)用溶液劑；②使用前需復(fù)溶的凍干粉；③現(xiàn)用混懸劑同一藥物的不同劑型吸收速率和分布的范圍可以不同，從而影響藥物起效時(shí)間、作用強(qiáng)度和維持時(shí)間等。皮下或肌內(nèi)注射吸收較口服為快，水溶液的吸收又比油溶液或混懸液為快；口服給藥時(shí)溶液劑型吸收最快，散劑次之，片劑和膠囊等須先崩解，故吸收較慢。一般說(shuō)來(lái)，吸收快的劑型藥物血濃度的峰值較高，單位時(shí)間內(nèi)排出也較多，故維持時(shí)間較短。吸收太慢則血藥峰濃度可能太低而影響療效。、GMP、GLP的主要內(nèi)容是？GMP是英文Good Manufacturing Practice 的縮寫(xiě)，中文的意思是“良好作業(yè)規(guī)范”，或是“優(yōu)良制造標(biāo)準(zhǔn)”，是一種特別注重在生產(chǎn)過(guò)程中實(shí)施對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量與衛(wèi)生安全的自主性管理制度。簡(jiǎn)要的說(shuō)，GMP要求食品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)具備良好的生產(chǎn)設(shè)備，合理的生產(chǎn)過(guò)程，完善的質(zhì)量管理和嚴(yán)格的檢測(cè)系統(tǒng)，確保最終產(chǎn)品的質(zhì)量（包括食品安全衛(wèi)生）符合法規(guī)要求。 GMP所規(guī)定的內(nèi)容，是食品藥品加工企業(yè)必須達(dá)到的最基本的條件。三要素： 檢查對(duì)象（1）人（2）生產(chǎn)環(huán)境（3）生產(chǎn)過(guò)程GLP是英文Good Laboratory Practice 的縮寫(xiě)，中文直譯為優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室規(guī)范。GLP是就實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)研究從計(jì)劃、實(shí)驗(yàn)、監(jiān)督、記錄到實(shí)驗(yàn)報(bào)告等一系列管理而制定的法規(guī)性文件，涉及到實(shí)驗(yàn)室工作的所有方面。主要內(nèi)容是在規(guī)定試驗(yàn)條件下，進(jìn)行藥效、毒性動(dòng)物試驗(yàn)的準(zhǔn)則：對(duì)急性，亞急性，慢性毒性試驗(yàn)，生殖試驗(yàn)，致癌，致畸，致突變以及其它毒性試驗(yàn)等臨床前安全試驗(yàn)作出規(guī)定，是保證藥品安全有效的法規(guī)。GLP的檢查對(duì)象 物飼養(yǎng)設(shè)施 ，蛋白藥物PEG化的有何優(yōu)點(diǎn)?；瘜W(xué)修飾（PEG化）、控釋微球制劑、脈沖式給藥系統(tǒng)PEG化優(yōu)點(diǎn)：可以對(duì)蛋白質(zhì)的分子進(jìn)行化學(xué)修飾以抑制其藥理清除達(dá)到延長(zhǎng)蛋白質(zhì)類(lèi)藥物血漿半衰期的目的。？其主要依據(jù)是？主要目的：為了治療需要和方便使用，把原料藥制成各種不同給藥形式，根據(jù)：藥典、藥品標(biāo)準(zhǔn)或其他適當(dāng)處方，將原料藥物按照劑型要求制成的最終供用藥對(duì)象使用的藥品統(tǒng)稱(chēng)為制劑