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醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法學(xué)簡介-資料下載頁

2025-05-26 04:21本頁面
  

【正文】 spectrophotometry) 應(yīng)用顯微光光度計(jì),以物質(zhì)分子對光波的選擇性吸收為基礎(chǔ),在顯微鏡下對生物樣品中的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。 形態(tài)計(jì)量術(shù)( morphometry) 運(yùn)用幾何學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)原理,對組織或細(xì)胞進(jìn)行二維和三維的形態(tài)測量研究,如對細(xì)胞的數(shù)量、體積、表面積和周長的相對和絕對值的測量等。 流式細(xì)胞術(shù)( flow cytometry) 是近年發(fā)展起來的細(xì)胞分類和定量研究技術(shù),能對細(xì)胞的生物化學(xué)和生物物理特性進(jìn)行快速定量測定,還可分選收集各種細(xì)胞。該技術(shù)的建立為細(xì)胞動力學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)和腫瘤學(xué)等的研究提供了重要的研究手段。如細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞的比例,同步分析細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA和蛋白質(zhì)的含量, T淋巴細(xì)胞亞群的分離和定量,淋巴細(xì)胞表面受體的分析,分離和濃縮造血干細(xì)胞,血細(xì)胞增殖情況,惡性腫瘤早期診斷,藥物作用機(jī)制等。 ( 七)組織培養(yǎng)技術(shù)( tissue culture) 是將離體的細(xì)胞、組織或器官置于培養(yǎng)基中,在無菌和適宜溫度及酸堿度條件下進(jìn)行培養(yǎng)成活,藉以觀察各種物理、化學(xué)和生物因素對組織或細(xì)胞的作用,探索和提示細(xì)胞生命活動規(guī)律和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能變化。 新鮮實(shí)體組織細(xì)胞分離 膠原纖維 酶消化法原理 緊密連接 粘多糖 常用酶 蛋白酶類 胰酶:脂鍵、肽鍵 膠原酶:膠原 溶菌酶:糖蛋白和肽的糖苷鍵 血管 彈性蛋白酶:糖蛋白和彈性蛋白 心臟 肝臟 注意: 溶解液 酶效價(jià) 時(shí)間 新鮮組織、酶解時(shí)間過長,細(xì)胞自溶 pH值 堿性:胃蛋白酶失活 中性:胰酶活性欠佳 酶純度 細(xì)胞膜改變 機(jī)械法 剪碎組織 100目尼龍網(wǎng)過濾(去除大組織塊) 離心 1000prm35分鐘,去上清 洗三次,每次離心( 500~800prm)取上清, 棄細(xì)胞碎片 300目尼龍網(wǎng)過濾去除細(xì)胞團(tuán)塊
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