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正文內(nèi)容

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法學(xué)簡(jiǎn)介(已修改)

2025-06-07 04:21 本頁(yè)面
 

【正文】 研究技術(shù) (一)光學(xué)顯微鏡技術(shù) (二)電子顯微鏡技術(shù) (三)組織化學(xué)術(shù) (四)免疫組織化學(xué)術(shù) (五)原位雜交術(shù) (六)細(xì)胞和細(xì)胞化學(xué)定量術(shù) (七)組織培養(yǎng)術(shù) (八)放射自顯影術(shù) 問(wèn) 題 解決方法 觀察對(duì)象太小 放大 顯微鏡 光線不能透過(guò)觀察對(duì)象 切片 觀察對(duì)象缺乏反差 染色 觀察對(duì)象生化成分不同 細(xì)胞化學(xué) 免疫組織化學(xué) 觀察對(duì)象為生活狀態(tài) 培養(yǎng) (一)光學(xué)顯微鏡技術(shù) 一般光學(xué)顯微鏡 熒光顯微鏡 相差顯微鏡 激光掃描共聚焦顯微鏡 (二)電子顯微鏡技術(shù) 透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 (三)組織化學(xué)術(shù) 多糖 脂類 酶 核酸 (四)免疫組織化學(xué)術(shù) (五)原位雜交術(shù) (六)細(xì)胞和細(xì)胞化學(xué)定量術(shù) 顯微分光光度測(cè)量術(shù) 形態(tài)計(jì)量術(shù) 流式細(xì)胞術(shù) (七)組織培養(yǎng)術(shù) (八)放射自顯影術(shù) ( 一)光學(xué)顯微鏡術(shù) light microscope( LM) 1 石蠟切片 ①取材 Formalin 40%, 4% ② 固定 Bouin Formalin 40% 25ml 苦味酸飽和水溶液 75ml 冰醋酸 5ml ③ 脫水 乙醇、包埋 石蠟 ④切片 6um ⑤ 脫蠟 二甲苯 → 乙醇 → 水 ⑥染色 HE Hematoxylin: 核酸 RER、 Ribosome Eosin: 蛋白、膜結(jié)構(gòu)( mitochondria、 SER、 lysosome) ⑦透明、封片 涂片 血涂片 精液 痰液 培養(yǎng)細(xì)胞 鋪片 磨片 骨和牙需制成磨片、經(jīng)染色后觀察 (二)電子顯微鏡技術(shù) 電子顯微鏡(簡(jiǎn)稱電鏡)的發(fā)明和使用,使組織胚胎學(xué)研究?jī)?nèi)容發(fā)生了深刻變化。光鏡分辨率為,放大倍數(shù)約為 1000倍,而電鏡的分辨率為,比光鏡高 1000倍,可放大幾萬(wàn)倍至幾十萬(wàn)倍,因此電鏡能觀察到更微細(xì)的結(jié)構(gòu)。在電鏡下所見的結(jié)構(gòu)稱為超微結(jié)構(gòu) (ultrastructure)。 用于觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),標(biāo)本制備比光鏡的要求更嚴(yán)格,組織塊要更新鮮,體積更?。?1mm3),固定常用戊二醛
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