醫(yī)學實驗常用方法學簡介-wenkub.com
2025-05-23 04:21 本頁面
【正文】 （ 七）組織培養(yǎng)技術（ tissue culture） 是將離體的細胞、組織或器官置于培養(yǎng)基中，在無菌和適宜溫度及酸堿度條件下進行培養(yǎng)成活，藉以觀察各種物理、化學和生物因素對組織或細胞的作用，探索和提示細胞生命活動規(guī)律和細胞的結構功能變化。 形態(tài)計量術（ morphometry） 運用幾何學和統(tǒng)計學原理，對組織或細胞進行二維和三維的形態(tài)測量研究，如對細胞的數(shù)量、體積、表面積和周長的相對和絕對值的測量等。熒光顯微鏡最常用于抗體滎光技術進行觀察，并成為醫(yī)學、生物學很多領域中極為有用的工具。 測定物質的熒光光譜或者激發(fā)光譜，可以判定物質性質（熒光光度法）。為顯示抗原抗體復合物的存在，需進行抗體標記；用熒光素如異硫氰酸熒光素標記，可以在熒光顯微鏡下觀察，用膠體金標記，可以在電鏡下觀察，用辣根過氧化酶標記，則可在光鏡下或在電鏡下觀察。亦可用鋨酸固定兼染色，脂類呈黑色。 多糖 顯示多糖或蛋白多糖的常用方法是過碘酸 — 雪夫反應 (periodic acid Schiff reaction,PAS反應 )。 激光掃描共聚焦顯微鏡 （ laser scanning confocal microscope） 是近年研制和應用的一種新型顯微鏡。 更好保存細胞內酶的活性、蛋白質結構。 用于觀察細胞內部結構，標本制備比光鏡的要求更嚴格，組織塊要更新鮮，體積更?。?1mm3），固定常用戊二醛和鋨酸。研究技術 （一）光學顯微鏡技術 （二）電子顯微鏡技術 （三）組織化學術 （四）免疫組織化學術 （五）原位雜交術 （六）細胞和細胞化學定量術 （七）組織培養(yǎng)術 （八）放射自顯影術 問 題 解決方法 觀察對象太小 放大 顯微鏡 光線不能透過觀察對象 切片 觀察對象缺乏反差 染色 觀察對象生化成分不同 細胞化學 免疫組織化學 觀察對象為生活狀態(tài) 培養(yǎng) （一）光學顯微鏡技術 一般光學顯微鏡 熒光顯微鏡 相差顯微鏡 激光掃描共聚焦顯微鏡 （二）電子顯微鏡技術 透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 （三）組織化學術 多糖 脂類 酶 核酸 （四）免疫組織化學術 （五）原位雜交術 （六）細胞和細胞化學定量術 顯微分光光度測量術 形態(tài)計量術 流式細胞術 （七）組織培養(yǎng)術 （八）放射自顯影術 （ 一）光學顯微鏡術 light microscope（ LM） 1 石蠟切片 ①取材 Formalin 40%, 4%
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