環(huán)境毒理學常用實驗方法-wenkub.com
2025-04-27 02:13 本頁面
【正文】 ? 根據(jù)測定生物半減期長短，判定受試物的蓄積毒性大小。 ? 生物半減期越長的物質(zhì)，表示越不易由體內(nèi)消除，其蓄積作用的可能性就越大。 蓄積毒性實驗 一、試驗方法 （二） 20天蓄積試驗法 ? 實驗處理 – 實驗動物：大鼠或小鼠 – 按 LD50的 1/ 1/ 1/ l/2及 0(溶劑對照 )隨機分成 5組，每個劑量組雌雄動物各 10只 – 每天對動物進行染毒 1次，連續(xù) 20天，各組總劑量分別為 1LD50、 2LD50、 4LD50、 10LD50。 ?分次染毒劑量為 1/20 LD50時，實驗時間可長達 100天，分次染毒劑量為 1/10 LD50時，實驗還可長達 50天。 蓄積毒性實驗 一、試驗方法 （一）蓄積系數(shù)法 固定劑量每天連續(xù)染毒法 劑量定期遞增染毒法 （二） 20天蓄積試驗法 （三）生物半減期法 一、試驗方法 （一）蓄積系數(shù)法（ cumulative coefficient method） 分次 給受試物后引起 50%受試動物出現(xiàn)某種毒效應(yīng)的總劑量（ ∑LD50(n)表示）與 一次 給受試物后引起 50%受試動物出現(xiàn)同一毒效應(yīng)的劑量（以 ∑LD50(1)表示）的比值，即 蓄積毒性實驗 )1(50)(50LDLDK n? 蓄積系數(shù)（ K ） 蓄積作用強度 1 高度蓄積 1 3 明顯蓄積 3 5 中毒蓄積 5 輕度蓄積 蓄積作用強度分級 蓄積毒性實驗 一、試驗方法 （一）蓄積系數(shù)法 ? 試驗方法 – 固定劑量每天連續(xù)染毒、劑量定期遞增染毒 ? 先按常規(guī)方法測定受試動物的 LD50或 ED50，此即 LD50(1)或 ED50(1)；然后另取動物進行 LD50(n)或 ED50(n)的測定。 – 進入速度 機體消除速度 — 不斷累積 — 毒性作用閾劑量 蓄積毒性實驗 蓄積毒性作用 環(huán)境污染物在體內(nèi)的蓄積作用的過程，表現(xiàn)為： ? 物質(zhì)蓄積 ：污染物不斷進入機體，其吸收量 排出量，以致在體內(nèi)的貯留量增多； ? 功能蓄積 ：不斷進入機體內(nèi)的環(huán)境污染物，反復作用機體，引起機體一定結(jié)構(gòu)或功能的變化，并逐漸累積加重，最后導致出現(xiàn)損害作用。 ? 試驗期間水環(huán)境 (DO、 pH、水溫 )穩(wěn)定。 急性毒性試驗 魚類毒性實驗 3. 半數(shù)耐受濃度的測定 ? 半數(shù)耐受濃度或半數(shù)存活濃度的測定試驗設(shè)計與哺乳動物的LD50測定基本相同。 急性毒性試驗 魚類毒性實驗 2. 實驗條件 ? 實驗容器采用玻璃缸或白搪瓷桶，其盛水量以每條魚 2～ 3L水為宜。 急性毒性試驗 魚類毒性實驗 1. 實驗用魚的選擇 ? 必須具有一定區(qū)域代表性，便于在實驗條件下飼養(yǎng)，對化學物質(zhì)較為敏感。 ? 以規(guī)定的間隔時間觀察刺激或腐蝕作用的程度，同時作進一步描述以便對刺激作用給予全面、完整的評價。 急性毒性試驗 四、哺乳動物的急性毒性實驗 （三）局部作用試驗 /腐蝕試驗 ? 結(jié)膜囊染毒試驗。 急性毒性試驗 四、哺乳動物的急性毒性實驗 （三）局部作用試驗 用于研究一些化學物質(zhì)引起接觸的皮膚和黏膜的癥狀，如炎癥和燒傷。 急性毒性試驗 四、哺乳動物的急性毒性實驗 （二）急性閾劑量的測定 （ 2）刺激閾試驗 ? 刺激性氣體或蒸汽，對上呼吸道、眼睛和口腔等器官的黏膜會產(chǎn)生局部刺激作用，通過觀察毒物在不同濃度下引起的刺激癥狀，可找出毒物引起刺激癥狀的最低濃度，即閾濃度。 ? 實驗動物一般用小鼠或大鼠。 （ 1）對于新化學物質(zhì)，首先選用整體狀態(tài)及非特異性作用指標，如活動能力、應(yīng)激狀態(tài)、條件反射等。 ? 計算半致死劑量或濃度：確定絕對致死劑量或濃度、最小致死劑量或濃度和最大耐受劑量或濃度。 急性毒性試驗 四、哺乳動物的急性毒性實驗 （一）半數(shù)致死量 (LD50、 LC50)的測定 ? 染毒開始后應(yīng)觀察并記錄實驗動物的 中毒表現(xiàn)、生理狀況變化和死亡情況 。 ? 正式實驗時，按隨機分組原則分組，一般分成 5～ 6個實驗組 (必要時備對照組 )，每組 5～ 10只動物 (小鼠多用 10只 )。 急性毒性試驗 三、急性毒性試驗的內(nèi)容 （ 4）中毒癥狀的觀察 據(jù)染毒動物癥狀及體征，粗略了解毒物作用的程度和可能作用部位。 一次 ：瞬間染毒，如經(jīng)口染毒、經(jīng)注射途徑染毒，但
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