醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法學(xué)簡(jiǎn)介-文庫(kù)吧
2025-05-11 04:21 本頁(yè)面
【正文】 和鋨酸。切片則用超薄切片機(jī)，制成 50~80nm的超薄切片，用醋酸鈾和檸檬酸鉛染色，然后在電鏡下觀察并攝片。 透射電鏡（ transmission electron microscope） 用于觀察組織或細(xì)胞表面的微細(xì)結(jié)構(gòu)，標(biāo)本需經(jīng)噴鍍金屬膜特殊處理，然后在掃描電鏡下觀察，在熒光屏上掃描成像，呈現(xiàn)富于立體感的表面圖像，如細(xì)胞表面的微絨毛、纖毛和細(xì)胞伸出的偽足等。 掃描電鏡（ scanning electron microscope) 冰凍切片 組織置入液氮（ 196℃ ）快速凍結(jié)，恒冷切 片機(jī)切片、染色。 更好保存細(xì)胞內(nèi)酶的活性、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。 缺點(diǎn)：組織片厚，經(jīng)冷凍后易破壞組織結(jié)構(gòu) 熒光顯微鏡（ fluorescence microscope） 由光源、濾光系統(tǒng)和顯微鏡三個(gè)部分組成。光源為高壓汞燈，可產(chǎn)生紫外光，標(biāo)本中的自發(fā)熒光物質(zhì)或經(jīng)熒光素染色或標(biāo)記的結(jié)構(gòu)在紫外光激發(fā)下可產(chǎn)生各種顏色的熒光，以此來(lái)研究該熒光物質(zhì)在細(xì)胞和組織中的分布。 相差顯微鏡 （ phase contrast microscope） 用于進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)中活細(xì)胞的觀察，可使無(wú)色透明的細(xì)胞鏡下結(jié)構(gòu)反差明顯，圖像清晰。 激光掃描共聚焦顯微鏡 （ laser scanning confocal microscope） 是近年研制和應(yīng)用的一種新型顯微鏡。它將激光束落在樣品上，并作移動(dòng)掃描，對(duì)樣品內(nèi)某種熒光標(biāo)記的物質(zhì)進(jìn)行二維和三維的動(dòng)態(tài)微量分析測(cè)定?？捎脕?lái)研究活細(xì)胞內(nèi) Ca Na+和 K+等 pH值的動(dòng)態(tài)變化；細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞器、細(xì)胞骨架、核酸、蛋白質(zhì)和受體等的定位和定量分析；細(xì)胞膜電位、膜通道及信息傳遞的檢測(cè)；利用激光對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)或染色體作切割、分離和克隆等逐漸成為生物醫(yī)學(xué)研究中重要的研究手段。 （三）組織化學(xué)術(shù)（ histochemistry） 應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)與物理反應(yīng)原理檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)某種化學(xué)成分并進(jìn)行定位、定量及相關(guān)功能研究的技術(shù)。 多糖 顯示多糖或蛋白多糖的常用方法是過(guò)碘酸 — 雪夫反應(yīng) (periodic acid Schiff reaction,PAS反應(yīng) )。組織或細(xì)胞中的多糖被結(jié)合形成紫紅色沉淀物。此反應(yīng)稱 PAS陽(yáng)性反應(yīng)，PAS陽(yáng)性部位為多糖存在部位。 脂類 標(biāo)本用甲醛固定，冷凍切片，用油紅 O、尼羅藍(lán)或蘇丹類染料染色，使組織和細(xì)胞中的脂類物質(zhì)顯示相應(yīng)顏色。亦可用鋨酸固定兼染色，脂類呈黑色。 酶 酶細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)的基本原理是利用酶對(duì)其相應(yīng)底物的水解、氧化等作用，使底物的反應(yīng)產(chǎn)物被某種捕獲劑捕獲并在原位沉淀，形成有色的終產(chǎn)物，借此測(cè)定該酶在細(xì)胞內(nèi)的分布及活性強(qiáng)弱。 核酸 顯示 DNA的傳統(tǒng)方法是 Feulgen反應(yīng)
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1