醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法學(xué)簡(jiǎn)介(參考版)
2025-05-29 04:21本頁面
【正文】 新鮮實(shí)體組織細(xì)胞分離 膠原纖維 酶消化法原理 緊密連接 粘多糖 常用酶 蛋白酶類 胰酶：脂鍵、肽鍵 膠原酶：膠原 溶菌酶：糖蛋白和肽的糖苷鍵 血管 彈性蛋白酶：糖蛋白和彈性蛋白 心臟 肝臟 注意： 溶解液 酶效價(jià) 時(shí)間 新鮮組織、酶解時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞自溶 pH值 堿性：胃蛋白酶失活 中性：胰酶活性欠佳 酶純度 細(xì)胞膜改變 機(jī)械法 剪碎組織 100目尼龍網(wǎng)過濾（去除大組織塊） 離心 1000prm35分鐘，去上清 洗三次，每次離心（ 500~800prm）取上清， 棄細(xì)胞碎片 300目尼龍網(wǎng)過濾去除細(xì)胞團(tuán)塊 。如細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞的比例，同步分析細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA和蛋白質(zhì)的含量， T淋巴細(xì)胞亞群的分離和定量，淋巴細(xì)胞表面受體的分析，分離和濃縮造血干細(xì)胞，血細(xì)胞增殖情況，惡性腫瘤早期診斷，藥物作用機(jī)制等。 流式細(xì)胞術(shù)（ flow cytometry） 是近年發(fā)展起來的細(xì)胞分類和定量研究技術(shù)，能對(duì)細(xì)胞的生物化學(xué)和生物物理特性進(jìn)行快速定量測(cè)定，還可分選收集各種細(xì)胞。 標(biāo)記胰島素 cRNA探針 ， 示胰島素 mRNA陽性 （六）細(xì)胞和細(xì)胞化學(xué)定量術(shù) 顯微分光光度測(cè)量術(shù) 形態(tài)計(jì)量術(shù) 流式細(xì)胞術(shù) 顯微分光光度測(cè)量術(shù)（ microspectrophotometry） 應(yīng)用顯微光光度計(jì)，以物質(zhì)分子對(duì)光波的選擇性吸收為基礎(chǔ)，在顯微鏡下對(duì)生物樣品中的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。 Glial fibrillary acidic protein 熒光色素 +物質(zhì) 激發(fā)方法 吸收波長(zhǎng) 輻射熒光 （自發(fā)熒光） 維生素 A 紫外（ UV） 325345nm 470490nm 維生素 B6 紫外（ UV）
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