高效液相色譜法ppt課件-資料下載頁
2025-05-07 12:09本頁面
【正文】 tR↑， k↑ 堿性物質(zhì) ——加入堿 NH3H 2O tR↑， k↑ ? 調(diào)節(jié) pH范圍： ~ pH 破壞鍵合相與載體的結(jié)合 pH 腐蝕柱子 3） 適用：極弱酸堿物質(zhì) pH=3~7弱酸； pH=7~8弱堿；兩性化合物 第四節(jié) 影響分離的因素 1． 22114 kknR???????uCAH ???流動相采用粘度小、低流速的勻的固定相：采用粒度小、填充均n39。39。39。39。12121212RRRRVVttkkKK ?????溫影響?。┵|(zhì)和固定相性質(zhì)（受柱：調(diào)整流動相種類、性?039。ttVVKVCVCWWk Rmsmmssms ??????。┑呐浔龋ㄊ苤鶞赜绊戄^：調(diào)整流動相和固定相k續(xù)前 2． 對流動相的要求： 1） 與固定液不反應(yīng) 2） 對樣品有良好溶解度 k=1~10 k=2~5 最理想的 3） 與檢測器匹配： UV（ 常用 ， 測定波長應(yīng)大于溶劑的截止波長 ） 熒光 ， 電化學(xué) 4） 使用粘度小 、 純度高的流動相 （ 甲醇 ， 乙腈 ） 使用前過濾 、 脫氣 續(xù)前 3．洗脫方式 1） 等度洗脫 （ 恒組成溶劑洗脫 ） 以固定配比的溶劑系統(tǒng)洗脫組分 （ 一個泵 ） 類似 GC的等溫度洗脫 2） 梯度洗脫： 在一定分析周期內(nèi)不斷變換流動相的種類和比例 即不斷改變其極性 （ 兩個泵 ） 適于分析極性差別較大的復(fù)雜組分 類似 GC的程序升溫 （ 沸程較長樣品 ） 圖示 第五節(jié) 高效液相色譜儀 1． 泵： 恒壓泵：流量精度不穩(wěn) 恒流泵：常用 2． 進(jìn)樣裝置 1） 隔膜進(jìn)樣 （ 高分子有機(jī)硅膠墊 →進(jìn)樣室 ） GC系統(tǒng)壓力較小 ， 可以 HPLC系統(tǒng)壓力太大 ， 必須停泵進(jìn)樣 （ 早期 ） 2） 閥進(jìn)樣：不必停泵 ， 六通閥 續(xù)前 3． 色譜柱：直徑 4~6mm,柱長 10~30cm 柱效評價：色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護(hù) 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測器 1） 紫外檢測器：適于吸收紫外光的物質(zhì) 2） 熒光檢測器：只能分析自身發(fā)光的物質(zhì) 靈敏度高 3） 示差折光檢測器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴(yán)格 4） 電化學(xué)檢測器 5） 化學(xué)發(fā)光
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