發(fā)酵條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)ppt課件-資料下載頁
2025-05-06 18:05本頁面
【正文】 ， 放入 37℃ 液體搖床 250rpm， IPTG誘導(dǎo)后繼續(xù)震蕩培養(yǎng) 5h； 收集每管重組大腸桿菌菌液 ， 3000rpm離心 10min,棄上清 ， 留沉淀 ， － 20℃ 與室溫下反復(fù)凍融沉淀 3次 ； 細(xì)菌的裂解：將菌體沉淀混勻在 9 體積 PBS中，4℃ 孵育 5min。 3000rpm離心 10min后，稱取菌體的濕重，每克濕重的菌體加入 10ml裂解緩沖液， 1mg溶菌酶重懸，充分混勻， 37℃ 。 洗滌與純化： 12022rpm(擬為 4000)離心10min,獲取沉淀 ， 用 2M尿素洗滌 2次 (擬刪 )，得到包涵體的粗提物； 稱取包涵體的重量 ， 以此初步判斷每組培養(yǎng)條件下重組大腸桿菌的蛋白表達(dá)量； 采用正交實(shí)驗(yàn)直觀分析法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 ， 確定較優(yōu)的培養(yǎng)基濃度 。 六 、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 討論直觀法正交實(shí)驗(yàn)分析的優(yōu)缺點(diǎn)； 應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn)直觀法確定重組干擾素產(chǎn)生菌大腸桿菌培養(yǎng)基成分的優(yōu)化配比 ， 作為進(jìn)一步發(fā)酵罐發(fā)酵依據(jù) 。
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