培養(yǎng)技術ppt課件-資料下載頁
2025-05-02 13:14本頁面
【正文】 胞數(shù)； ?計數(shù)器計數(shù)法： 在顯微鏡下用血球計數(shù)器直接數(shù)出酵母菌或霉菌孢子數(shù)目，以及用細菌計數(shù)片直接測出細菌數(shù)。 測定細胞重量 ?細胞干重稱量法 直接測定單位體積培養(yǎng)物的細胞干重，由此代表菌體細胞物質(zhì)總量 ?細胞堆積容積測量法 用錐形刻度管測量經(jīng)離心的細胞沉淀物的容積 ，由此間接表示細胞重量 ?細胞組成分析法 測定一種大分子的細胞組成 (蛋白質(zhì)、 RNA、DNA等 )，間接地算出細胞重量 ?營養(yǎng)物消耗分析法 測定培養(yǎng)基中不用于合成代謝產(chǎn)物的營 養(yǎng)物（磷酸鹽、硫酸鹽等）的消耗，間接表示細胞重量的生長 ?產(chǎn)物重量分析法 測定培養(yǎng)中途形成的二氧化碳，氫，ATP等產(chǎn)物，由此間接地換算出細胞重量的生長 菌絲形態(tài)也能反映菌生長情況 顯微鏡觀察 第四節(jié) 營養(yǎng)基質(zhì)的影響及其控制 ?發(fā)酵液中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，特別是碳氮比、無機鹽和維生素的濃度，會直接影響菌體的生長和代謝產(chǎn)物的積累。 ?如：半乳糖苷可使大腸桿菌 ?半乳糖苷酶的產(chǎn)量增加 1000倍； 枯草桿菌既產(chǎn)淀粉酶，又產(chǎn)蛋白酶，提供葡萄糖，只產(chǎn)生蛋白酶。 黑曲霉檸檬酸發(fā)酵 ?蔗糖濃度 15%18%，蔗糖同化率 97%； ?蔗糖濃度 20%，只同化 92%； ?蔗糖濃度低于 10%，產(chǎn)檸檬酸少，積累草酸； ?蔗糖濃度低于 %，不產(chǎn)檸檬酸。 ?一般在發(fā)酵中后期為保證產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物，有意使菌體處于 半饑餓狀態(tài) ，在營養(yǎng)限制的條件下，維持產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物的速率在較高水平。 ?對于這種工藝，后期的補料控制是關鍵。 一、碳源的影響和控制 ?迅速利用的碳源 —— 利于菌體生長； ?緩慢利用的碳源 —— 利于延長代謝產(chǎn)物的合成。 糖耗：反映產(chǎn)生菌的生長繁殖情況和產(chǎn)物合成的活力； ?糖含量測定包括： ?總糖： 指發(fā)酵液中殘留的各種糖的總量。如發(fā)酵中的淀粉、飴糖、單糖等各種糖。 ?還原糖： 指含有自由醛基的單糖，通常指的是葡萄糖。 葡萄糖效應 大腸桿菌培養(yǎng)于含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中，出現(xiàn)兩次生長旺盛期 。 菌先利用葡萄糖生長繁殖 ,葡萄糖耗盡后，過一段時間菌體才開始利用乳糖 。 即使加入乳糖酶誘導物，葡萄糖沒耗盡，利用乳糖的酶系也不能合成。 思考題 ?乳糖和葡萄糖，誰更適合作為青霉素發(fā)酵的碳源，為什么？ 二、氮源的影響和控制 ?氨基氮：指有機氮中的氮（ NH2N），如氨基酸、黃豆餅粉、花生餅粉中的氮； ?氨氮：指無機氨中的氮（ NH3N）。 ?迅速利用的氮源 —— 利于菌體生長； ?緩慢利用的氮源 —— 利于延長代謝產(chǎn)物的合成 補氮工藝 補加有機氮源：土霉素 —— 玉米漿 青霉素 —— 尿素 補加無機氮源：氨水、硫酸銨 磷是核酸的組成部分，是高能化合物 ATP的組成部分，磷還能促進糖代謝。因此，磷在培養(yǎng)基中具有非常重要的作用，如果磷缺乏就要采取補磷措施 三、磷酸鹽的影響和控制 ?適合微生物生長的磷酸鹽濃度：～ 300mmol ?適合次級代謝產(chǎn)物合成的磷酸鹽濃度：
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