【正文】 2 粒細胞的制備 3 單核細胞制備 4 骨髓 細胞中白血病細胞的制備 5 網(wǎng)織紅細胞的制備 血液單細胞樣品的制備 網(wǎng)織紅細胞的制備 protocol: 1 取全血 ， 注入盛有 2 用微量取溶器吸取 50ul EDTA抗 凝血置于另一離心管中 ， 加入Good′s 緩沖液 ， 離心沉淀 100Orpm， 5min,連續(xù)洗三次 血液單細胞樣品的制備 網(wǎng)織紅細胞的制備 protocol: 3 將沉淀細胞加入 緩沖液 ， 輕輕振蕩懸浮 4 將懸浮液緩注入盛有 %戊二 醛 緩沖液中固定 ， 若即上機檢測 ， 固定 15min即可 血液單細胞樣品的制備 網(wǎng)織紅細胞的制備 protocol: 如不馬上檢測 ， 可固定 2h后 ，PBS洗去固定劑 ， 加入 橡酸納緩沖液 ， 置入 ℃ 冰箱備檢 ， 可保存一周時間 血液單細胞樣品的制備 網(wǎng)織紅細胞的制備 protocol: 5 FCM分析前 ， 用 PBS洗去固定 劑 ， 加入 %派若寧 Y工作液 ， 染色 30min后 ， 離心 沉淀棄去染液 ， 用 PBS離心洗滌一次 ， 1500rpm， 5min， 去上清液 ， 再用 PBS將細胞懸浮上機檢測 Source: 1 實體組織 2 血液 3 脫落細胞 4 單層培養(yǎng)細胞 Introduction 脫落細胞單細胞樣品的制備 Review: 在臨床實際工作中 ， 可收集到大量自然脫落的細胞 ， 這些細胞標本經(jīng)過簡單的處理 ， 就可得到較好的單分散細胞懸液 ， 所以是流式細胞術檢測的天然樣品 脫落細胞單細胞樣品的制備 Categorization: 1宮頸脫落細胞懸液 的制備 2食管 脫落細胞懸液的制備 3胸腹水 脫落細胞的制備 4內(nèi)鏡 刷檢 樣品單細胞懸液制備 5 沖洗 液樣品單細胞懸液制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 宮頸脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 1 首先用 NS沖洗宮頸表面的分泌 物 ,以海棉輕拭宮頸表面 ,將海棉 中吸附的脫落細胞洗脫到 20ml NS 中 脫落細胞單細胞樣品的制備 宮頸脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 2 收集細胞懸液 ,以 1500rpm離心 沉淀 ,用 NS洗滌 2次 ,每次 5min,棄上清后加入 70%乙醇 3ml固定備檢 脫落細胞單細胞樣品的制備 Categorization: 1宮頸脫落細胞懸液 的制備 2食管 脫落細胞懸液的制備 3胸腹水 脫落細胞的制備 4內(nèi)鏡 刷檢 樣品單細胞懸液制備 5 沖洗 液樣品單細胞懸液制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 食管脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 1 將食管拉網(wǎng)器上的細胞洗脫到 10ml NS 中 ,以 1500rpm離心沉淀 ,再用 NS洗滌 2次 ,離心 500800rpm， 12min,棄上清 脫落細胞單細胞樣品的制備 食管脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 2 調(diào)整細胞數(shù)在 2X106/ml,可進行標記染色上機 ,如不馬上檢測可用70% 的冰乙醇固定保存 3 在標記染色前如發(fā)現(xiàn)細胞有團塊聚集 ， 可用 %胃蛋白酶 ()在 37℃ 水浴箱中消化 510min，振蕩分散為單細胞懸液 脫落細胞單細胞樣品的制備 Categorization: 1宮頸脫落細胞懸液 的制備 2食管 脫落細胞懸液的制備 3胸腹水 脫落細胞的制備 4內(nèi)鏡 刷檢 樣品單細胞懸液制備 5 沖洗 液樣品單細胞懸液制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 胸腹水脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 1 抽取胸腹水 200300ml， 加入抗凝 劑 (肝素或拘橡酸 鈉 )5ml， 放入容 器中置 04℃ 冰箱靜置 612h， 棄 上清 2 留取沉淀液 1020ml， 吸入試管 內(nèi) ， 以 NS洗三次 ， 以 1500rpm離 心沉淀 5min 脫落細胞單細胞樣品的制備 胸腹水脫落細胞懸液 的制備 Protocol: 3 離心沉淀后加入冷拘橡酸緩沖液 5ml， 在室溫下放置 20min 4 用 300目篩網(wǎng)過濾后 ， 以 PBS洗 去 枸 橡酸緩沖液 ， 離心沉淀去上清 ， 加入 70%乙醇固定備檢 脫落細胞單細胞樣品的制備 Categorization: 1宮頸脫落細胞懸液 的制備 2食管 脫落細胞懸液的制備 3胸腹水 脫落細胞的制備 4內(nèi)鏡 刷檢 樣品單細胞懸液制備 5 沖洗 液樣品單細胞懸液制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 內(nèi)鏡刷檢樣品單 細胞懸液 的制備 Protocol: 1 將刷檢的毛刷放入 10ml NS 中洗 脫 ， 收集懸液進入試管 ,以 1500rpm離心沉淀 ， 再以 NS漂洗 23次 ， 每次 500800rpm離心沉 淀 2min， 棄上清 脫落細胞單細胞樣品的制備 內(nèi)鏡刷檢樣品單 細胞懸液 的制備 Protocol: 2 以 300目篩網(wǎng)過濾 ， 去除細胞 碎片 3 70%冷乙醇固定 ， 置于冰箱 備檢 脫落細胞單細胞樣品的制備 Categorization: 1宮頸脫落細胞懸液 的制備 2食管 脫落細胞懸液的制備 3胸腹水 脫落細胞的制備 4內(nèi)鏡 刷檢 樣品單細胞懸液制備 5 沖洗 液樣品單細胞懸液制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 沖洗液樣品單 細胞懸液 的制備 Protocol: 1 用 300500ml NS 沖洗胃或膀脹 ，沖洗一定時間后 ， 吸出沖洗液放入容器中于冰箱內(nèi)置 612h 2 取沉淀 2040ml， 離心沉淀 ， 并以 NS洗兩次 ， 棄上清液 3 過濾后加入 70%乙醇固定備檢 脫落細胞單細胞樣品的制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 脫落細胞單細胞樣品的制備 Source: 1 實體組織 2 血液 3 脫落細胞 4 單層培養(yǎng)細胞 Introduction 單層培養(yǎng)細胞樣品的制備 Protocol: 1 首先用 PBS沖洗 細胞 2遍 2 以 %胰酶消化細胞 2min左右，以吸管吹打細胞至其懸浮 3 收集細胞至離心管， 1000rpm, 5min離心，棄上清 4 加入 70%乙醇固定備檢 單層培養(yǎng)細胞樣品的制備 單層培養(yǎng)細胞樣品的制備