【正文】 ③ 1/20LD50組無(wú)死亡，各組也不呈劑量 反應(yīng)關(guān)系，則為無(wú)明顯蓄積性； ④如僅 1/2LD50組有死亡，其他組均無(wú)死亡，則為弱蓄積性。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄二、蓄積作用的研究方法 （二）生物半減期法 生物半減期 (Biological Halflife, BL, T1/2)，指化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)以后，在體內(nèi)每減少一半所需的時(shí)間。對(duì)同一化合物在同一種動(dòng)物體內(nèi)是一恒值。 生物半減期法（ t1/2）是用毒物動(dòng)力學(xué)原理描述化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積作用。 化學(xué)毒物在體內(nèi)蓄積的速度和量與機(jī)體單位時(shí)間內(nèi)吸收該物質(zhì)的速度以及清除速度有關(guān)。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄一般來(lái)說(shuō)， tl/2較短的化學(xué)毒物達(dá)到蓄積極限所需的時(shí)間也短， t1/2長(zhǎng)者達(dá)到蓄積極限的時(shí)間也長(zhǎng)。 一種化學(xué)毒物若以 tl/2相等的時(shí)間間距染毒，其在體內(nèi)經(jīng)過(guò) 6個(gè) t1/2的接觸期就可以基本上達(dá)到蓄積的極限，此時(shí)理論蓄積量達(dá)到極限的 ％。此后即使繼續(xù)接觸該物質(zhì)，機(jī)體內(nèi)的蓄積量基本上也不會(huì)增加。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄蓄積過(guò)程 : 第一個(gè) BL(T1/2)末蓄積量 =L 50% 第二個(gè) BL(T1/2)末蓄積量 =L 75% 第三個(gè) BL(T1/2)末蓄積量=L % 第四個(gè) BL(T1/2)末蓄積量=L % 第五個(gè) BL(T1/2)末蓄積量=L % 第六個(gè) BL(T1/2)末蓄積量=L % 一般經(jīng)過(guò) 6個(gè)生物半減期 即可達(dá)蓄積極限值 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄根據(jù) tl/2=，通過(guò)動(dòng)物血漿中化學(xué)毒物濃度求得 tl/2。 蓄積極限值 1 / 24 4 a ??A∞—— 蓄積極限值（ mg） a —— 單位時(shí)間內(nèi)毒物的吸收量（ mg/d） T1/2—— 生物半減期（ d） 應(yīng)用： 可根據(jù)一個(gè)化合物的 t1/2值，計(jì)算出它在人體內(nèi)達(dá)到的 A∞值，并可計(jì)算出達(dá)到Ｌ值所需的時(shí)間 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄（三）蓄積率測(cè)定法 常用的動(dòng)物為小鼠或大鼠，首先將受試動(dòng)物分成蓄積試驗(yàn)組和對(duì)照組兩大組，每組動(dòng)物數(shù) 60~70只。蓄積性試驗(yàn)組動(dòng)物每次以一定劑量（低于最小致死量）按同一染毒途徑預(yù)先給受試物，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間之后，按常規(guī)方法測(cè)定蓄積性試驗(yàn)組和對(duì)照組的 LD50，并按下列公式計(jì)算蓄積率。 蓄積率 = 蓄積組給予受試物的總劑量 蓄積率應(yīng)標(biāo)明預(yù)先給予受試物的時(shí)間及劑量。在相同時(shí)間及劑量條件下，蓄積率越大表示該物質(zhì)在體內(nèi)的蓄積作用越強(qiáng)；反之，蓄積性則越弱。 對(duì)照組 LD50蓄積組 LD50 100% 一、慢性毒性的概念 二、慢性毒性試驗(yàn)的目的 三、慢性毒性試驗(yàn)方法要點(diǎn) 四、慢性毒件試驗(yàn)的注意事項(xiàng) 第四節(jié) 慢性毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì) ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄一、慢性毒性的概念 是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人長(zhǎng)期（甚至終生）反復(fù)接觸外源化學(xué)物所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)。 所謂“長(zhǎng)期”，一般是指 2年。 對(duì)大鼠相當(dāng)于終生染毒，對(duì)兔相當(dāng)于生命期的 36%，對(duì)犬為 20%，對(duì)猴為 13％。對(duì)于有些遠(yuǎn)期毒性評(píng)價(jià)，試驗(yàn)期要求達(dá)到 7~10年，甚至在有些動(dòng)物上要包括若干代試驗(yàn)。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄研究慢性毒性劑量 反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系。 確定長(zhǎng)期接觸造成有害作用的最低劑量（ LOAEL)或閾劑量和未造成有害作用的劑量（ NOAEL)； 為制定外來(lái)化學(xué)物質(zhì)在食品中的安全限量，如人體 ADI值，最高殘留限量 MRL值，以及為危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)與管理提供毒理學(xué)依據(jù)； 觀察慢性毒性效應(yīng)譜、毒作用特點(diǎn)和毒作用靶器官，為毒性機(jī)制研究和將毒性結(jié)果外推到人提供依據(jù)。 二、慢性毒性試驗(yàn)的目的 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄三、慢性毒性試驗(yàn)方法要點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 實(shí)際工作中大多用大鼠、犬和猴。 年齡：剛斷乳的動(dòng)物 小白鼠 3周齡 大白鼠 3~4周齡 犬 4~6周齡 動(dòng)物數(shù)量要明顯多于亞慢性試驗(yàn)，每組大鼠 40～60只，犬 8～ 12只，雌雄各半。 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每一性別嚙齒類動(dòng)物數(shù)不少于 10只，非嚙齒類不少于 4只。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄染毒途徑和時(shí)限 染毒方法和途徑盡量選擇和人類接觸途徑相似的方式。一般采用經(jīng)口染毒，多采用飼喂法。 研究工業(yè)毒物一般認(rèn)為染毒 6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間，環(huán)境毒物與食品的慢性毒性試驗(yàn)染毒期則要求 1年以上或 2年。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄劑量分組 高劑量組不能出現(xiàn)明顯中毒，但要有輕微毒性反應(yīng)； 中劑量組應(yīng)為慢性毒性作用的閾值劑量； 低劑量組應(yīng)為慢性毒性的最大無(wú)作用劑量組（ NOAEL）。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄劑量分組：一般設(shè) 3個(gè)染毒劑量組和 1個(gè)對(duì)照組，必要時(shí)另設(shè) 1個(gè)溶劑對(duì)照組。 一般認(rèn)為以亞慢性毒性試驗(yàn)的 LOAEL等確定。以其 1/5～ 1/2為高劑量組，以 1/50～ 1/10為中劑量組， 1/100為低劑量組。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄如無(wú)亞慢性試驗(yàn)資料，可以參照 LD50值設(shè)計(jì)劑量。 如以 l/10 LD50，為高劑量組， 1/100 LD50為中劑量組， l/l000 LD50為低劑量組。組間劑量差一般以 5～ 10倍為宜，最低不小于 2倍。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄觀察指標(biāo) 一般性指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)室檢查、病理學(xué)檢查及其它特異性指標(biāo)的檢查四方面。 以亞慢性毒性試驗(yàn)所提供的毒效應(yīng)和靶器官為基礎(chǔ)，重點(diǎn)觀察在亞慢性毒性試驗(yàn)中已經(jīng)顯現(xiàn)的陽(yáng)性指標(biāo)。優(yōu)先采用亞慢性毒性試驗(yàn)篩選出來(lái)的敏感指標(biāo)或特異性指標(biāo)。 ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄四、慢性毒性試驗(yàn)的注意事項(xiàng) 試驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的要求 試驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)和試驗(yàn)環(huán)境規(guī)范化十分重要。 檢測(cè)條件的控制 重視試驗(yàn)前和對(duì)照組的檢測(cè)，動(dòng)態(tài)地、密切地觀察檢測(cè)試驗(yàn)全過(guò)程各項(xiàng)指標(biāo)的變化。 慢性毒性作用評(píng)價(jià) ?上一內(nèi)容 ?回主目錄 ?返回 ?下一內(nèi)容 ?返回 上一內(nèi)容 下一內(nèi)容 回主目錄慢性毒性試驗(yàn)所得的最大無(wú)作用劑量（以 mg/kg體重計(jì)） ≤人群的可能攝入量的 50倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)予以放棄； 在 50～ 100倍之間者，需相關(guān)專家共同評(píng)議； 大于或等于 100倍者，則可考慮允許使用于食品，并制定衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。 慢性閾劑量和最大無(wú)作用劑量越小，衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求越嚴(yán)格。 思考題 ，選擇的依據(jù)。 ？ 。 。 LD50 的方法。 。 ？ 原理，測(cè)定蓄積系數(shù)有哪些方法。