【正文】 使用前后都要用火焰灼燒滅菌。3．2接種操作：接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上，每個錐形瓶接種7～8個外植體?！妓伎?〗外植體接種與細菌接種相似之處是操作步驟相同，而且都要求無菌操作。3．3培養(yǎng)過程應該放在無菌箱中進行，并定期進行消毒，保持適宜的溫度和光照。3．4移栽前應先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間，進行壯苗。最后進行露天栽培。［思考9］外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染，你認為造成污染的原因有哪些？外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。（三）課堂總結(jié)、點評菊花的組織培養(yǎng)基本原理細胞的全能性基本過程脫分化愈傷組織再分化影響因素材料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件操作流程配制MS固體培養(yǎng)基外植體的消毒接種培養(yǎng)移栽栽培資料——克隆羊多利2003年2月14日蘇格蘭羅斯林研究所證實世界上首只成年體細胞克隆動物多利已經(jīng)死亡。多利的尸體將被制成標本，存放在蘇格蘭國家博物館。多利于1996年7月5日出生，于1997年2月23日被介紹給公眾，它是用一只6歲母羊的體細胞進行克隆，由羅斯林研究所與英國PPL醫(yī)療公司共同培育而成的。羅斯林研究所所長哈里格里芬說，綿羊通常能活11到12年。但2002年1月科學家發(fā)現(xiàn)多利羊的左后腿患上了關節(jié)炎這種典型的“高齡病癥”，現(xiàn)在，多利羊壯年死于老年羊常得的肺部感染疾病。研究人員對它實施了“安樂死”。世界第一只體細胞克隆動物多利羊的誕生曾震驚了世界，它的死也引起了人們對克隆動物的關注、以及對克隆技術發(fā)展前景的再思考。 課題2 月季的花藥培養(yǎng)【教學目標】（一）知識與技能識記被子植物花粉發(fā)育的過程通過學習花藥培養(yǎng)的基本技術，培養(yǎng)設計試驗、動手操作、分析解釋實驗現(xiàn)象的能力（二）過程與方法列表比較花藥培養(yǎng)與組織培養(yǎng)選擇適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基（三）情感、態(tài)度與價值觀培養(yǎng)動手實踐、勇于探索的科學探究素質(zhì)通過討論花藥離體培養(yǎng)技術在生產(chǎn)實踐中的應用，幫助學生確立理論聯(lián)系實際的觀點【教學重點】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學難點】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學方法】啟發(fā)式教學【教學工具】多媒體課件【教學過程】（一）引入新課利用植物的莖可以經(jīng)過組織培養(yǎng)得到新植株，但這種方法同時也存在著一定的缺陷，繁殖出來的新植株往往無法獲得一些新的性狀。本節(jié)我們將學習花藥離體培養(yǎng)技術，這是一種信的育種技術。（二）進行新課1．基礎知識活動2：閱讀“被子植物的花粉發(fā)育”，回答下列問題：1．被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過 分裂形成的。2．結(jié)合教材內(nèi)容填下列示意圖：小孢子母細胞（2n）（ ）時期（n）單核（ ）期（n）雙核期（ ）細胞核（n）（ ）細胞核（n）（ ）細胞（n）（ ）細胞（n）（ ）個精子(n)（ ）分裂（ ）分裂單核（ ）期（n）（ ）分裂〖思考2〗由此可見，被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 四分體 時期， 單核 期和 雙核 期等階段?！妓伎?〗在正常情況下，一個小孢子母細胞可以產(chǎn)生 4 個精子；在一枚花藥中可以產(chǎn)生 很多 個花粉?！妓伎?〗營養(yǎng)細胞在花粉萌發(fā)過程中的作用是什么？控制花粉的萌發(fā)并提供營養(yǎng)?；顒?：閱讀“產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑”，討論并回答下列問題：1．產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）的兩種途徑：一是花粉通過 胚狀體 階段發(fā)育為植株，二是通過 愈傷組織 階段發(fā)育為植株。這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基中 激素 的種類及其 濃度 的配比。2．填寫培育花粉植株的途徑圖解：（ ）花藥中的花粉（ ）（ ）（ 胚狀體 ）（ 愈傷組織 ）（ ）叢芽生根移栽3．胚狀體的結(jié)構(gòu)及其發(fā)育過程與種子相似，所以把胚狀體到從芽的過程稱為 分化 ，而把從愈傷組織到從芽的過程稱為 再分化 ?；顒?：閱讀“影響花藥培養(yǎng)的因素”，回答下列問題：1．影響花粉植株的主要因素： 材料的選擇 和 培養(yǎng)基的組成 等。2．材料的選擇：①從花藥來看，應當選擇（初花期、盛花期、晚花期）的花藥；②從花粉來看，應當選擇（四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期）的花粉；③從花蕾來看，應當選擇（完全未開放、略微開放、完全盛開）的花蕾?！妓伎?〗除此之外，你認為影響花粉誘導成功率的因素還有哪些？植物的種類、親本生長條件、材料的低溫處理、接種密度、培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)的環(huán)境條件等?！妓伎?〗為什么不選擇使用單核期之前或之后的花粉？單核期之前，花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；單核期之后，花瓣開始松動，消毒困難?！妓伎?〗花瓣松動會給材料消毒帶來困難的原因是 外界環(huán)境中的微生物容易侵入到花藥中 。2．實驗設計活動5：閱讀“材料的選擇”，回答下列問題：1．選擇花藥時一般通過 鏡檢 確定花粉發(fā)育時期，此時需要對花粉細胞核進行染色，最常用的染色劑是 醋酸洋紅溶液 和 焙花青－鉻釩溶液 ，它們分別可以將細胞核染成 紅 色和 藍黑 色。2．在使用焙花青－鉻釩溶液時，需要首先將花藥用 卡諾氏固定液 處理20min。該試劑的配制方法是將 無水酒精和冰醋酸 按體積比為 3：1 的比例混合均勻?；顒?：閱讀“材料的消毒”，填寫下列流程圖：花蕾（70％酒精）大約30s（無菌水）清洗（無菌吸水紙）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（無菌水）沖洗〖思考8〗月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？在酒精消毒前，花藥不需要預先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗?；顒?：閱讀“接種和培養(yǎng)”，回答下列問題：1．剝?nèi)』ㄋ帲合竞蟮幕ɡ?，要? 無菌 條件下除去花萼、花瓣?！妓伎?〗剝?nèi)』ㄋ帟r，一是注意不要損傷花藥，原因是 容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織 ；二是要徹底除去花絲，原因是 花絲不利于愈傷組織或胚狀體的形成 。2．接種花藥：剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 培養(yǎng)基 上。每個培養(yǎng)瓶接種 7～10 個花藥。3．培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 25 ℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照?！妓伎?0〗在花藥培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 IAA ；在誘導叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 BA ；在誘導生根的培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 IAA 。4．培養(yǎng)20－30d后，花藥開裂，長出 愈傷組織 或釋放出 胚狀體 。前者還要轉(zhuǎn)移到 分化培養(yǎng)基 上進行分化培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快 分開 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。5．通過愈傷組織形成的植株，常常會出現(xiàn) 染色體倍性 的變化，因而需要鑒定和篩選?！妓伎?1〗為什么通過愈傷組織形成的植株會發(fā)生染色體倍性的變化？（05全國理綜III）有些是由花粉發(fā)育形成的單倍體花粉植株，有些是由花粉壁細胞發(fā)育形成的二倍體花藥壁植株。（三）課堂總結(jié)、點評本課題有一定難度，成功率較低。全部完成課題不僅耗時較長，又有季節(jié)限制。最好課前做好時間規(guī)劃，以提高工作效率。建議教師提前做好相關環(huán)節(jié)的準備，如花蕾的選擇、培養(yǎng)基配方等。同時對于興趣較高的同學可以安排在課外動手嘗試，教師提供相關的技術指導。（四）實例探究例1．某名貴花卉用種子繁殖會發(fā)生性狀分離。為了防止性狀分離并快速繁殖，可以利用該植物的一部分器官或組織進行離體培養(yǎng)，發(fā)育出完整植株。進行離體培養(yǎng)時不應采用該植株的（ ）A．莖尖 B．子房壁 C．葉片 D．花粉粒解析：本題主要考查無性生殖特點。涉及知識點有：組織培養(yǎng)、體細胞、生殖細胞等。抓住無性生殖能夠保持原物種特性這一特點。組織培養(yǎng)就是無性生殖的一種方式，它是由體細胞培養(yǎng)而來的，含有原物種的全部基因，而花粉粒是生殖細胞。該題易陷入思維定勢，聯(lián)想到花粉粒的離體培養(yǎng)?？梢?，植物組織培養(yǎng)若取自體細胞則為無性生殖；若取自生殖細胞則為有性生殖。答案：D例2． 一個初級精母細胞在減數(shù)分裂的第一次分裂時，有一對同源染色體不發(fā)生分離，所形成的次級精母細胞減數(shù)分裂的第二次分裂正常；另一個初級精母細胞減數(shù)分裂的第一次分裂正常，減數(shù)第二次分裂時，在兩個次級精母細胞中，有一個次級精母細胞的1條染色體姐妹染色單體沒有分開。以上兩個初級精母細胞可產(chǎn)生染色體數(shù)目不正常的配子（以下簡稱不正常的配子）。上述兩個初級精母細胞減數(shù)分裂的最終結(jié)果應當是A． 兩者產(chǎn)生的配子全部都不正常 B． 前者產(chǎn)生一半不正常的配子，后者產(chǎn)生的配子不正常C． 兩者都產(chǎn)生一半不正常的配子D．前者產(chǎn)生全部不正常的配子，后者只產(chǎn)生一半不正常的配子1. 若不給自己設限，則人生中就沒有限制你發(fā)揮的藩籬。2. 若不是心寬似海，哪有人生風平浪靜。在紛雜的塵世里，為自己留下一片純靜的心靈空間，不管是潮起潮落，也不管是陰晴圓缺，你都可以免去浮躁，義無反顧，勇往直前，輕松自如地走好人生路上的每一步3. 花一些時間，總會看清一些事。用一些事情，總會看清一些人。有時候覺得自己像個神經(jīng)病。既糾結(jié)了自己，又打擾了別人。努力過后，才知道許多事情，堅持堅持，就過來了。4. 歲月是無情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。歲月是有情的，假如你奉獻給她的是一些色彩，它奉獻給你的也是一些色彩。你必須努力，當有一天驀然回首時，你的回憶里才會多一些色彩斑斕，少一些蒼白無力。只有你自己才能把歲月描畫成一幅難以忘懷的人生畫卷。學習參考