β-內(nèi)酰胺酶的分類及檢測-資料下載頁
2025-01-19 19:13本頁面
【正文】 噻肟 /克拉維酸抑菌圈 ? 頭孢曲松抑菌圈 1624mm ≥頭孢噻肟抑菌圈 3 mm ? ? 驗(yàn)方法 初篩試驗(yàn) 表型確證試驗(yàn) 培養(yǎng)基 CAMHB CAMHB 抗菌藥物濃度 頭孢泊肟 1μg /mL或 頭孢他啶 μg /mL ? 頭孢他啶 1μg /mL或 頭孢他啶 /克拉維酸 ? 氨曲南 1μg /mL或 和 ? 頭孢噻肟 1μg /mL或 頭孢噻肟 μg /mL ? 頭孢曲松 1μg /mL 頭孢噻肟 /克拉維酸 ? （同時用多于一種抗生素 （確證試驗(yàn)要求同時做上述 ? 可提高試驗(yàn)靈敏度） 四種紙片） 孵育條件 同標(biāo)準(zhǔn) MIC法 同標(biāo)準(zhǔn) MIC法 結(jié)果 生長 =可疑產(chǎn) ESBL 有一種抗菌素生素出現(xiàn)加有克拉維酸 （例： MIC ≥ 2 μg /mL） 的 MIC≥沒有加克拉維酸的 MIC 3個對 倍稀釋度 =產(chǎn) ESBL 質(zhì)量控制 陰性對照 ATCC25922 =無生長 ? 陽性對照 ATCC700603 陽性對照 ATCC700603 ? 頭孢泊肟抑菌圈 ≥ 2 μg /mL 有一種抗菌素生素出現(xiàn)加有克拉維 ? 頭孢他啶抑菌圈 ≥ 2 μg /mL 的 MIC≥沒有加克拉維酸的 MIC 3個對 ? 氨曲南抑菌圈 ≥ 2 μg /mL 倍稀釋度 ? 頭孢噻肟抑菌圈 ≥ 2 μg /mL ? 頭孢曲松抑菌圈 ≥ 2 μg /mL 二、 AmpC β內(nèi)酰胺酶的檢測 ? 1．初篩試驗(yàn) ? 2 ．頭孢西丁三相水解試驗(yàn) ? 3 ．聯(lián)合用克拉維酸和氯唑西林兩種抑制 平行試驗(yàn) ? AmpC酶的檢測 ? 1． 酶的提取 ? 凍融法 超聲波破碎法 ? 1個菌落 1個菌落 ? 種入 12ml大豆湯 。 35度震搖 46h 種入 40ml大豆湯 。 35度震搖過夜 ? 4度 40000rpm， 離心 20min， 去上清液 4度 4000rpm， 離心 20分鐘 ， 去上清 ? ? 沉淀物 890度反復(fù)凍溶 5次 重懸在 的 .01MPBS中 ， ? 加入 ， 超聲波破碎 10秒 ， 間隔 15秒重復(fù) 旋轉(zhuǎn)混勻 。 10次 ? ? 4度 12,000轉(zhuǎn) rpm離心 20分鐘 4度 12,000rpm離心 20分 ? ? 取上清 ， 20度保存?zhèn)溆? 取上清液 ， 20度保存?zhèn)溆? ? 1． 測定方法 ? 0. 5麥?zhǔn)蠁挝粷舛鹊拇竽c桿菌 ATCC25922 涂在 MH平皿上 ， 中心貼頭孢西丁紙片 （ 30） ? ? 切出 34個不同方向的狹縫 ， 鉤出其中的瓊脂 ? ? 每溝中加入待測菌的 40 的粗提物 ? ? 35度孵育過夜 ? ? 觀察結(jié)果
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