其它標(biāo)記免疫分析技術(shù)-資料下載頁(yè)
2025-01-18 18:53本頁(yè)面
【正文】 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析 （ chemiluminescence enzyme immunoassay， CLEIA） 是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過(guò)氧化物酶（ HRP）或堿性磷酸酶 (ALP)來(lái)標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原 (抗體 )發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測(cè)抗原 酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加入底物 (發(fā)光劑 )，酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算出測(cè)定物的濃度。 二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 該分析系統(tǒng)采用辣根過(guò)氧化物酶（ HRP）標(biāo)記抗體 (或抗原 )，在與反應(yīng)體系中的待測(cè)標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測(cè)抗原 酶（ HRP）標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)加入魯米諾發(fā)光劑、 H2O2和化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。 （一） HRP標(biāo)記的 CLEIA 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 該分析系統(tǒng)以堿性磷酸酶 標(biāo)記抗體 (或抗原 )，在與反應(yīng)體系中的待測(cè)標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測(cè)抗原 酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)加入 AMPPD發(fā)光劑，堿性磷酸酶使 AMPPD脫去磷酸根基團(tuán)而發(fā)光。 （二） ALP標(biāo)記的 CLEIA 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 增強(qiáng)發(fā)光酶免疫分析 (enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA ) 在發(fā)光系統(tǒng)中加入增強(qiáng)發(fā)光劑 , 如對(duì) 2碘苯 酚等 , 以增強(qiáng)發(fā)光信號(hào) , 并在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定 , 便于重復(fù)測(cè)量 , 從而提高分析靈敏度和準(zhǔn)確性。 （三）增強(qiáng)發(fā)光酶免疫分析 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ? 電化學(xué)發(fā)光免疫分析（ electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA） 是以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體 (抗原 )，以三丙胺 (TPA)為電子供體，在電場(chǎng)中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過(guò)程。 三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （一）電化學(xué)發(fā)光原理 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中，磁性微粒為固相載體包被抗體 (抗原 )，用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體(抗原 )，在反應(yīng)體系內(nèi)待測(cè)標(biāo)本與相應(yīng)的抗原 (抗體 )發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成磁性微粒包被抗體 待測(cè)抗原 三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)將上述復(fù)合物吸入流動(dòng)室，同時(shí)引人 TPA緩沖液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時(shí)，被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住，而未結(jié)合的標(biāo)記抗體和標(biāo)本被緩沖液沖走。與此同時(shí)電極加壓，啟動(dòng)電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，使三聯(lián)吡啶釕和 TPA在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光，光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原的濃度成正比。 （二）電化學(xué)發(fā)光免疫分析 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定示意圖 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) （ 1）蛋白質(zhì)、激素和腫瘤檢測(cè) （ 2）病毒、毒物檢測(cè) （ 3）其它方面應(yīng)用 （三）電化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用與發(fā)展 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) ① 敏感度高，甚至超過(guò) RIA； ②精密度和準(zhǔn)確性均可與 RIA相比； ③試劑穩(wěn)定，無(wú)毒害； ④測(cè)定耗時(shí)短； ⑤測(cè)定項(xiàng)目多； ⑥已發(fā)展成自動(dòng)化測(cè)定系統(tǒng)。 四、在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用 返回章目錄 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) 小 結(jié) 發(fā)光是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過(guò)程?；瘜W(xué)發(fā)光是吸收了化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中所產(chǎn)生的化學(xué)能使分子激發(fā)而發(fā)光。化學(xué)發(fā)光免疫分析是將化學(xué)發(fā)光與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)微量抗原或抗體的標(biāo)記免疫分析技術(shù)，分為直接化學(xué)發(fā)光免疫分析，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析和電化學(xué)發(fā)光免疫分析。 返回章目錄 人民衛(wèi)生出版社 第九章 其它標(biāo)記免疫分析技術(shù) THANK YOU FOR YOUR ATTENTION! 返回總目錄
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