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核酸的序列分析ppt課件-資料下載頁(yè)

2025-01-14 22:12本頁(yè)面
  

【正文】 品的 4個(gè)測(cè)序反應(yīng)物分別在不同泳道進(jìn)行,而自動(dòng)測(cè)序可在一個(gè)泳道內(nèi)電泳,提高電泳分析的效率 檢測(cè)手段不同:手工測(cè)序采用放射自顯影,從 4種寡聚核苷酸的梯子形圖譜中讀出 DNA序列,而自動(dòng)測(cè)序則采用激光掃描器同步掃描,計(jì)算機(jī)進(jìn)行閱讀和編輯 DNA序列測(cè)定的自動(dòng)化 1. DNA測(cè)序步驟與自動(dòng)化 1)模板制備 可自動(dòng)化 2)定序反應(yīng) 可自動(dòng)化 3)凝膠電泳 自動(dòng)化有一定困難:制膠,點(diǎn)樣,電泳,凝膠干燥,放射自顯影。 4)核苷酸序列閱讀與計(jì)算機(jī)輸入 可自動(dòng)化 Conney等人于 1987年設(shè)計(jì)了不同熒光染料標(biāo)記引物,然后做鏈終止測(cè)序,用激光掃描閱讀序列。 紅色 引物 +T反應(yīng)系統(tǒng)(引物 +DNA+dNTP+ddTTP) 黃色 引物 +G反應(yīng)系統(tǒng)(引物 +DNA+dNTP+ddGTP) 綠色 引物 +A反應(yīng)系統(tǒng)(引物 +DNA+dNTP+ddATP) 蘭色 引物 +C反應(yīng)系統(tǒng)(引物 +DNA+dNTP+ddCTP) 目前市場(chǎng)上已經(jīng)有各種型號(hào)的DNA自動(dòng)測(cè)序儀可供選購(gòu)。 “分子生物學(xué)研究方法 ” 思考題: 常用的核酸的凝膠電泳是哪兩種?它們分辨DNA片段的范圍有何不同? 電泳操作的基本程序有哪些? 核酸的分子雜交的概念? Southern 印跡法、Northern 印跡法和 Western 印跡法的檢測(cè)對(duì)象分別是什么? 什么叫探針( Probe)? PCR定義?簡(jiǎn)述聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的基本原理? 核酸 測(cè)序的常用方法有哪些?
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