核酸的序列分析ppt課件-閱讀頁
2025-01-29 22:12本頁面
【正文】 應體系，隨機斷裂 DNA片段某種堿基中的任何一個，產(chǎn)生一組一端為放射線標記的末端，另一端為不同大小的DNA片段的混合物 電泳分離，放射自顯影得到互相錯落的梯形圖譜，即可讀出 DNA序列 堿基特異性修飾及裂解 反應體系 堿基修飾試劑 堿基修飾反應 主鏈斷裂試劑 斷裂點 G 硫酸二甲酯 鳥嘌呤甲基化 六氫吡啶 G G+A 甲酸 脫嘌呤作用 六氫吡啶 G和 A C+T 肼 嘧啶開環(huán) 六氫吡啶 C和 T C 肼（加鹽） 胞嘧啶開環(huán) 六氫吡啶 C 化學法讀序 每組測序圖譜為 4條垂直的階梯帶，該片從膠底部一個個向頂部讀， G+A和 C+T兩列中含有所有相差一個堿基的DNA片段。 從單塊凝膠上能得到可靠序列數(shù)量約為 200300bp以內(nèi) 化學裂解法的特點 ? 優(yōu)點： 所測序列直接來源于所測 DNA ，避免了 DNA 復制中錯誤 dNTP 的摻入。 ? 缺點： 操作復雜，讀序困難。 4）核苷酸序列閱讀與計算機輸入 可自動化 Conney等人于 1987年設(shè)計了不同熒光染料標記引物，然后做鏈終止測序，用激光掃描閱讀序列。 “分子生物學研究方法 ” 思考題： 常用的核酸的凝膠電泳是哪兩種？它們分辨DNA片段的范圍有何不同？ 電泳操作的基本程序有哪些？ 核酸的分子雜交的概念？ Southern 印跡法、Northern 印跡法和 Western 印跡法的檢測對象分別是什么？ 什么叫探針（ Probe)？ PCR定義？簡述聚合酶鏈式反應的基本原理？ 核酸 測序的常用方法有哪些？
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