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工業(yè)微生物育種誘變劑-資料下載頁(yè)

2025-01-13 22:27本頁(yè)面
  

【正文】 A:T的專一性誘變劑,因此,可以用來(lái)鑒別突變體是 A:T G:C還是 G:C A:T轉(zhuǎn)換。 ? 羥胺的處理方法: 常用濃度為 — 5%,可直接在溶液中處理,時(shí)間 1— 2h,然后分離培養(yǎng)。但一般都加到瓊脂平板或振蕩培養(yǎng)基中,然后接入孢子或細(xì)菌,在適溫下培養(yǎng),生長(zhǎng)過(guò)程中處理,所用濃度比直接處理時(shí)低些。 金屬鹽類 ? 用于誘變育種的金屬鹽類主要有氯化鋰、硫酸錳等。 ? 氯化鋰單獨(dú)使用沒(méi)有明顯的誘變效果,幾乎都要與其他誘變劑配合處理,因此也稱為 助誘變劑 。它在高產(chǎn)菌種選育史上發(fā)揮了極其顯著的作用。 其他化學(xué)誘變劑 ? 1. 秋水仙堿:是誘發(fā)細(xì)胞染色體多倍體的誘變劑。自 1937年美國(guó)學(xué)者布萊克斯利( )等,用秋水仙素加倍曼陀羅等植物的染色體數(shù)獲得成功以后,秋水仙素就被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)的研究和植物育種。 ? 秋水仙素能抑制有絲分裂,破壞紡錘體,使染色體停滯在分裂中期,使具備兩套染色體的母細(xì)胞無(wú)法分裂,導(dǎo)致多倍體產(chǎn)生。 ? 2. 抗生素 :作為誘變劑的抗生素主要有鏈黑霉素,爭(zhēng)光霉素,絲裂霉素,放線菌素,正定霉素,光輝霉素和阿霉素等。都是抗癌藥物,效果不如烷化劑,應(yīng)用不廣泛。 重視化學(xué)誘變劑的操作安全 誘變劑 在 DNA上的初級(jí)效應(yīng) 遺傳反應(yīng) 堿基類似物 摻入作用 AT?GC 轉(zhuǎn)換 羥胺 同胞嘧啶起羥化反應(yīng) GC→AT 轉(zhuǎn)換 亞硝酸 A、 C的脫氧基作用 DNA交聯(lián) AT→GC 轉(zhuǎn)換 缺失 烷化劑 烷化堿基(主要是 G)而導(dǎo)致: 脫嘌呤作用;烷化堿基的互變異構(gòu)作用; DNA鏈的交聯(lián)作用;糖 磷酸骨架的斷裂 堿基臵換( AT?GC 轉(zhuǎn)換、AT→TA 顛換、 GC→CG 顛換)及染色體畸變 吖啶類 個(gè)別堿基的插入或缺失 移碼突變 紫外線照射 形成嘧啶二聚體;形成嘧啶的水合物;DNA交聯(lián); DNA斷裂 AT→GC 轉(zhuǎn)換、 AT→GC 顛換、 及移碼突變 電離輻射 脫氧核糖 堿基之間化學(xué)鍵及脫氧核糖 磷酸之間化學(xué)鍵的斷裂;通過(guò)自由基對(duì)DNA的作用 AT?GC 轉(zhuǎn)換、移碼突變及染色體畸變 小結(jié) 第三節(jié) 生物誘變劑 ? 噬菌體 ? 基因定點(diǎn)誘變劑 ? 生物誘變劑的主要誘變方式 噬菌體 ?采用某些噬菌體來(lái)篩選抗噬菌體突變菌株時(shí),常常發(fā)現(xiàn)伴隨著出現(xiàn)抗生素產(chǎn)量明顯提高的抗性突變株。因此,可以認(rèn)為這些溶源性噬菌體是一種生物誘變劑。 基因定點(diǎn)誘變 隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,點(diǎn)突變技術(shù)在蛋白質(zhì)工程中正得到廣泛應(yīng)用,特定寡核苷酸在突變技術(shù)中起著介導(dǎo)作用,使基因成為一種新的分子水平生物誘變劑。 寡核苷酸介導(dǎo)的定點(diǎn)誘變 生物誘變劑的主要誘變方式 ? 1. 轉(zhuǎn)導(dǎo)誘發(fā)突變 概念: 經(jīng)完全或部分缺餡噬菌體的媒介,將供體菌的小片段DNA攜帶至受體菌中,經(jīng)配對(duì)、雙交換后整合至供體菌內(nèi)而獲新的遺傳性狀之現(xiàn)象。 烈性噬菌體: 隨機(jī)轉(zhuǎn)導(dǎo),宿主細(xì)菌的基因型發(fā)生改變; 溫和噬菌體: 特定轉(zhuǎn)導(dǎo),使供體菌和受體菌都產(chǎn)生基因突變。 生物誘變劑的主要誘變方式 ?2. 轉(zhuǎn)化誘發(fā)突變 供體菌:由細(xì)胞自溶等釋 放 DNA片段; 受體菌:直接吸附并吸收 供體菌 DNA片段; 在體內(nèi):經(jīng)配對(duì)、交換與整 合成為自體基因組 的部分,再經(jīng)復(fù)制 形成一個(gè)轉(zhuǎn)化子 . 感受態(tài):轉(zhuǎn)化中受體細(xì)胞最 易接納外源 DNA片 段的一種生理狀態(tài)。 生物誘變劑的主要誘變方式 ? 1. 轉(zhuǎn)導(dǎo)誘發(fā)突變 ? 烈性噬菌體:隨機(jī)轉(zhuǎn)導(dǎo),使宿主細(xì)菌的基因型發(fā)生改變; ? 溫和噬菌體:特定轉(zhuǎn)導(dǎo),也能使供體細(xì)菌和受體細(xì)菌都產(chǎn)生基因突變。 ? 2. 轉(zhuǎn)化誘發(fā)突變 ? 3. 轉(zhuǎn)座誘發(fā)突變 轉(zhuǎn)座因子是在染色體組中或染色體組間不斷改變自身位臵的一段 DNA序列 基因定點(diǎn)誘變 PCR定點(diǎn)誘變 課堂討論 誘變劑在微生物育種中的作用和地位如何? 誘變劑都有哪些效應(yīng)? 紫外線引起的胸腺嘧啶二聚體對(duì)微生物有何影響?哪些修復(fù)系統(tǒng)可對(duì)此進(jìn)行修復(fù),其結(jié)果如何? 試述各種誘變劑的作用機(jī)制。 思考題 ? 1 四種常用的物理誘變劑的誘變機(jī)制和生物學(xué)效應(yīng)是什么? ? 2 紫外線照射劑量的表示方法有哪些? ? 3 簡(jiǎn)述紫外線誘變的過(guò)程。 ? 4 哪些因素會(huì)影響化學(xué)誘變劑的誘變效應(yīng)? ? 5 如何用營(yíng)養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變測(cè)定法定性定量地測(cè)定某種化學(xué)物質(zhì)的誘變作用? 今日話題 ? 太空育種 ?太空育種即航天育種,也稱空間誘變育種,是將作物種子或誘變材料搭乘返回式衛(wèi)星或高空氣球送到太空,利用太空特殊的環(huán)境誘變作用,使種子產(chǎn)生變異,再返回地面培育作物新品種的育種新技術(shù)。
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