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微生物遺傳變異與育種(1)-資料下載頁

2025-01-14 00:15本頁面
  

【正文】 體帶有 “ TOX”基因 ( 三 ) 接合 ● 接合:通過細(xì)胞間的直接接觸 ,由質(zhì)粒介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象 . ● 接合子:通過接合 而獲得新的遺傳 性狀的受體細(xì)胞。 ● 存在方式 :四種接合型菌株 F F+ 菌株 Orit:起始子 Hfr菌株: 高頻重組菌株, F+整合在染色體上 成為附加體的狀態(tài),若與 F 接合,有很高 的重組頻率。 1)細(xì)胞接觸 2) Hfr斷裂、轉(zhuǎn)移、 復(fù)制 3)接合中斷 4)形成接合子 ● 利用 接合中斷法繪制染色體圖譜 (分析方法 :營缺型接合為重組型 ) ● 中斷雜交試驗(yàn) 基因測序 (鳥槍法) F ′ 菌株 (質(zhì)粒帶有部分染色體片斷的菌株) 初生 F ′ 菌株 次生 F ′ 菌株 建議讀物 基因水平轉(zhuǎn)移是細(xì)菌進(jìn)化的主要動力 —— 《 微生物功能基因組學(xué) 》 作業(yè) : 在大腸桿菌中發(fā)生了基因重組現(xiàn)象 .請用一組試驗(yàn)證明發(fā)生該重組的過程是轉(zhuǎn)化 ,轉(zhuǎn)導(dǎo)或者接合 ? (四)原生質(zhì)體融合 通過人為方法 ,使遺傳性狀不同的兩個(gè) 細(xì)胞的原生質(zhì)體融合 ,繼而遺傳重組 ,借 以獲得兼有雙親性狀 ,遺傳性穩(wěn)定的融 合子的過程。 ● 主要步驟: 1)選擇親本 2)制備原生質(zhì)體 3)促融 4)原生質(zhì)體再生 5)融合子檢出 6)篩選 Metabolic engineering by genome shulffling Nature biotechnology 2022, 20, 666 建議讀物: 總結(jié): 167。 .5 菌種衰退、復(fù)壯和保藏 ● 菌種衰退現(xiàn)象:形態(tài)、生長速度、代謝產(chǎn)物、致病性、抗逆性等 ●復(fù)壯:通過分離純化和測定,從衰 退群體中篩選未退化的個(gè)體。 菌種 衰退的防止: 1)減少傳代次數(shù) 2)良好培養(yǎng)條件 3)利用不易衰退 的細(xì)胞傳代 4) 菌種的有效保藏 ● 菌種保藏相關(guān)問題: 1.保藏條件:低溫、干燥、無氧、低 營養(yǎng)、保護(hù)劑 菌種的有效管理 保藏機(jī)構(gòu): ATCC、 CCTCC 、 DSMZ 有效的保藏方法 ● 常用保藏方法比較: 微生物同源重組的一般概念和模型 補(bǔ)充材料 同源重組: 兩條同源的 DNA分子,通過配對、鏈的斷裂和再連接,而產(chǎn)生片斷交換的過程。 雙交換:兩個(gè)連鎖基因間發(fā)生兩次交換。 ABC abc 可以看作先發(fā)生 a b一次交換 -- Ab--- c--- -- a-- BC 然后 b c間再發(fā)生一次交換 -- A b--- C a-- B--- c-- 基因重組的 Holliday 模型 4. 連接 5. 分支遷移 180176。 Holliday連接體 連接 ?雙鏈斷裂修復(fù)模型 DNA D環(huán) (右 ) . sostak 大腸桿菌同源重組 (RecBCD核酸酶 )
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