微生物遺傳變異與育種(1)-文庫吧
2024-12-30 00:15 本頁面
【正文】 ） 可大量擴(kuò)增 4）容易分離 5）可攜帶小于 10kb外源 DNA 6） 帶有 2個選擇標(biāo)記 。 7） 多個單一酶切位點 8） 容易轉(zhuǎn)化 ● 利用選擇標(biāo)記鑒別攜帶外源片段的轉(zhuǎn)化子 (雙抗菌素對照篩選） 建議讀物 167。 .2 基因突變和誘變育種 一、基因突變 ●野生型菌株：從自然界分離獲得的菌株， 稱之為 ? 。 ●基本培養(yǎng)基 (MM)：滿足野生型菌株生長最 低營養(yǎng)要求的合成培養(yǎng)基。 （一）突變類型 ●營養(yǎng)缺陷型：野生型菌株由于突變而喪失 了某種營養(yǎng)合成能力，而無法在基本培 養(yǎng)基上生長的變異類型。 表示： 基 因： his+， his ； 表 型： His + ， His – 完全培養(yǎng)基：滿足 各種 營缺型菌株生長營養(yǎng)要求的天 然或半組合培養(yǎng)基。 ● 抗性突變型： 野生型菌株由于突變而產(chǎn)了對某些化學(xué)藥物或致死物理因子抗性變異類型。 表示： 基 因： strr、 strs； tetr、 tets； 表 型： Str r ， Str s ● 條件致死突變型： 某些菌株或病毒經(jīng)基因突變后，在某種條件可生長并實現(xiàn)表型，而在另一條件卻無法生長繁殖的突變類型。 (如溫度敏感突變株： Ts） ●形態(tài)突變株 ●抗原突變株 ●產(chǎn)量突變株 ● 突變株類型劃分： 選擇性突變株：營養(yǎng)缺陷型、抗性 突變型、條件致死突變型 非選擇突變株：形態(tài)、抗原、產(chǎn)量 突變型 （二）突變率及其撿出 ●突變率： 某一細(xì)胞在每一世代中發(fā)生突變的幾率。常用單位群體中每一世代產(chǎn)生的突變株的數(shù)目來表示。 ● 突變株的撿出及突變率的計算 1) 撿出方法： 營養(yǎng)缺陷型 。 抗藥性突變 等選擇性突變類型 2) 突變率測定 突變菌數(shù) /總菌數(shù) （三）基因突變的自發(fā)性與不對稱性 ●突變的自發(fā)性：基因可自發(fā)產(chǎn)生突變。 （輻射、自身有害物質(zhì)、堿基配對錯誤） ●突變的不對應(yīng)性：突變性狀與引起突變 的環(huán)境因素?zé)o直接對應(yīng)關(guān)系。 ● 平板影印培養(yǎng)試驗 (Lederberg) （四）基因突變及其機(jī)制 誘發(fā)突變 (點突變 , 畸變 ) 1)點突變 (1)堿基置換 轉(zhuǎn)換 顛換 ● 可能的突變型： 錯義突變 無義突變 同義突變 ● 相關(guān)的誘變劑 －－直接引起置換： 亞硝酸、亞硝基胍、羥胺、烷化劑 －－間接引起置換： 堿基類似物 （ 5－ BU, 5AU) 2）移碼突變 DNA序列中插入或缺失少數(shù)核苷酸，從而使該處后面遺傳密碼的 閱讀框架 發(fā)生改變的突變。 2） 染色體畸變 DNA分子的大段損傷，包括缺失、重復(fù)、 插入、易位（轉(zhuǎn)座）和倒拉等。 ● 轉(zhuǎn)座： DNA分子通過 非同源重組 方式， 從染色體的某一部位轉(zhuǎn)移到另一部位的 現(xiàn)象。 ● 轉(zhuǎn)座因子 凡具有轉(zhuǎn)座作用的 DNA序列均稱之 ~。 特點： 轉(zhuǎn)座作用 末端重復(fù)序列 轉(zhuǎn)座酶基因 ● 轉(zhuǎn)座因子類型 ?插入序列 ?細(xì)菌轉(zhuǎn)座子 (Tn,轉(zhuǎn)座子 )包括復(fù)合轉(zhuǎn)座子和復(fù)雜轉(zhuǎn)座子） ?轉(zhuǎn)座噬菌體 a）插入序列 (IS) b） 轉(zhuǎn)座子 (Tn) ● 轉(zhuǎn)座機(jī)理 ● 轉(zhuǎn)座子的遺傳效應(yīng)和生
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