【正文】 三種“雄性”菌株與 F－ 接合后的結果 F＋ F－ 2F＋ 由性菌毛將不同接合型的的細菌連在一起，并且在細胞間形成胞質橋（也稱接合管）。在形成接合對以后， F＋ 菌的 F因子進行 DNA滾環(huán)復制。單鏈轉入 F－ 菌，并合成新的互補鏈。 Hfr F－ Hfr＋ F－ Hfr的染色體雙鏈中的一條鏈在 F因子處發(fā)生斷裂，由環(huán)狀變?yōu)榫€狀， F因子則位于線狀單鏈DNA的末端，整段線狀染色體（單鏈）也以 5 ′－末端引導，等速地轉移至 F－ 細胞。 通過接合而獲得新性狀的受體細胞稱為接合子。（ conjugant） F ′ F－ 2F ′ Hfr菌株的 F因子的反常切除所形成的 F因子有兩種類型： I 型：包含了染色體一個區(qū)域和不完全的 F ′因子。 II型：帶有完整的 F因子 DNA和位于 F因子插入兩端的染色體基因。 F ′菌的共同特征 （ 1） I 型 F ′一般攜帶的基因是 Hfr上的末端，這部分基因在 Hfr F－ 時是低頻轉移的，而在 F ′ F－ 時卻是高頻轉移的。 （ 2） II型 F ′菌使本來轉移頻率差異懸殊的兩部分基因具有相同的頻率。 （ 3） F ′菌的最大特點是能構建穩(wěn)定的部分二倍體。 F因子轉導 ：通過 F ′因子的轉移而使受體菌改變 它的遺傳性狀的現象稱為 F因子轉導或 或性因子轉導或簡稱性導（ F duction 或 sex duction） 擬表型菌 ：指表型上屬于 F ′而遺傳性上仍是 F＋ 的菌，也就是說表面沒有性菌毛，因而 喪失了表面排斥性。 （六 ） 中斷雜交實驗 原理： 如果人為地中斷正在基因轉移的雜交對，然后測定受體菌里遺傳標記重組頻率，就能知道基因連鎖情況。 1957年， 。 供體菌 Hfr， 受體菌 F－ thr－ leu－ lac－ gal－ azir tonr strr， 將大約 10倍的 F－ 菌和 Hfr對數期菌混合，輕輕振蕩培養(yǎng)，在不同時間間隔取樣，在組織攪拌器中劇烈振蕩后，將培養(yǎng)物經適當稀釋后，涂布在含鏈霉素且以葡萄糖作為碳源的基本培養(yǎng)基上進行選擇。 中斷雜交實驗 中斷雜交實驗的結果： 基因是以 ori、 thr、 leu、 azi、 ton、 lac、 gal的順序連續(xù)轉移的。在這個實驗中，對 Hfr菌的條件是， str基因在整個待測順序的后端，如果 strs基因率先進入受體，獲得的重組體將在第一次選擇性培養(yǎng)基上被 str殺死。另外， thr、 leu選擇性標記應位于前端，如位于后端則無法測序。 二、放線菌的接合作用 （一）放線菌基因重組的發(fā)現 1955年， Sermonti夫婦在天蘭色鏈霉菌（ streptomyces coelicoler） ISS株中首次發(fā)現通過遺傳性交換而產生的重組，接著， Hopwood也用 A 3(2)發(fā)現了同樣的重組。 （二）放線菌的性別 三種性別 原始致育型（ IF， initial fertility）： 相當于 F＋ 正常致育型（ NF， normal fertility）： 相當于 Hfr 超致育型（ UF， ultra fertility）： 相當于 F－ 認為 IF相當于 F＋ 、 UF相當于 F－的理由 （ 1） IF以 ％的頻率轉變?yōu)?UF， 在經 uv處理的 IF群體中曾經得到作為受體高度可育的 UF菌株，這種情況類似于從 F＋ 菌株中得到 F－ 菌株； （ 2） IF UF雜交中， UF受體菌株全部轉變?yōu)?IF， 而染色體基因重組頻率大約為 10－ 4，兩者相差萬倍。這種情況與 F＋ F－ 相似。 認為 NF相當于 Hfr的理由 （ 1） IF和 NF都產生對于 UF菌株具有抑制作用的次甲霉素，而 UF菌株則不產生這一抗菌素； （ 2） IF UF雜交子代全部都是 IF， 這種轉變和染色體基因轉移無關，但是 NF UF雜交則不同， UF轉變?yōu)?NF都伴隨著染色體重組； （ 3） NF菌株來自 IF或是 IF的雜交子代，與 一樣。 （三）放線菌的致育因子 經研究發(fā)現在 Scp1的致育因子。 Scp1和 F因子一樣也是一種質粒，具有轉移性，在自身轉移的同時還能夠帶動染色體進行轉移。此外 Scp1還帶有與產生次甲霉素有關的基因， Scp1屬于附加體質粒。 （四）天蘭色鏈霉菌三種致育類型與大腸桿菌的三種致育類型之間的區(qū)別 大腸桿菌中 F－ F－ 是不育的，但在天蘭色鏈霉菌中 UF UF是可育的，只是頻率較低，說明還有另外一種致育因子的存在； 大腸桿菌中 F＋ F＋ 或 Hfr Hfr雜交的可育性很低，除非使其中一個成為 F－ 的擬表型，但在天蘭色鏈霉菌中 NF NF和 IF IF雜交中一部分是高度可育的； 大腸桿菌中 F＋ F－ 的子代都是 F－ 而 Hfr F－ 的子代都是 F－ ， 但在天蘭色鏈霉菌中 IF UF的子代是IF， NF UF的子代也是 NF。 三、采用接合技術育種 Hfr細菌和 F－ 細菌接觸帶來兩個細菌細胞的接合和染色體從 Hfr細菌向 F－ 細菌轉移。因此，接合雜交是確定特定基因的粗略位置的有效方法，也是育種的一種手段。 一般采用液體接合培養(yǎng)法，在接合時注意通氣和選擇標記。選擇性標記可以用抗性標記，也可以用營養(yǎng)缺陷型。 第二節(jié) 轉化與育種 轉化（ transformation） ： 受體細胞直接吸收來自供體細胞的離體 DNA片段，并通過交換把它整合到自己的基因組中，從而獲得了供體細胞的某些遺傳性狀的現象。獲得新性狀的受體稱為轉化子（ transformant）。 ＊ 轉化不是兩個細胞的直接接觸，而是供體細胞的離體 DNA與受體細胞直接接觸而轉移遺傳物質。 一、轉化過程 轉化包括兩個基本過程 （ 1）從供體菌中提取遺傳物質 DNA并轉移到受體中； （ 2）供體的遺傳物質在受體中的作用。 （一）轉化 DNA的特點 轉化子的數目與 DNA濃度的關系 在一定條件下轉化子的數目與轉化 DNA的濃度成正比。 細菌生長量 每毫升中轉化子數 104 105 103 102 20 40 60 80 100 120 10 100 培養(yǎng)時間 每毫升中轉化子數 10－ 3 10－ 2 10－ 1 DNA 轉化的飽和濃度 DNA片段的大小與轉化子數目的關系 對于轉化作用來說，轉化 DNA片段必須具有一定的大小。一般認為，轉化 DNA片段的大小沒有上限，但是在制備轉化子過程中，往往人工打斷供體 DNA分子，獲得的片段約 1